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原代細(xì)胞染色技術(shù)
一.臺盼藍(lán)染色
(1)制備單個細(xì)胞懸液,,并作適當(dāng)稀釋(106細(xì)胞/ml)。
(2)染色:取9滴細(xì)胞懸液移入小試管中,,加一滴0.4%臺盼藍(lán)溶液,,混勻。
(3)計數(shù):在3分鐘內(nèi),,用血球計數(shù)板分別計數(shù)活細(xì)胞和死細(xì)胞,。
(4)鏡下觀察,死細(xì)胞被染成藍(lán)色,,而活細(xì)胞拒染,。
(5)根據(jù)下式求細(xì)胞活力:
二.伊紅Y染色
(1)制備1×106-5×106細(xì)胞/ml的細(xì)胞懸液。
(2)取0.1ml細(xì)胞懸液加0.1ml伊紅Y染液混合,。
(3)用計數(shù)板鏡下計數(shù)活,、死細(xì)胞數(shù)。
(4)鏡下觀察,,著紅色的為死細(xì)胞,。按公式計算細(xì)胞活力。
三.苯胺黑染色實驗
(1)制備1×106-5×106細(xì)胞/ml的細(xì)胞懸液,。
(2)將1份1%苯胺黑溶液與含血清生理鹽水作1:9混合稀釋,,使其成0.1%苯胺黑染液,。
(3)取0.1ml細(xì)胞懸液加0.1ml苯胺黑染液混合。室溫放置10分鐘,。
(4)用計數(shù)板鏡下計數(shù) ,,黑色細(xì)胞為死細(xì)胞,按公式計算活細(xì)胞率,。