MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

產品貨號：P20311

產品規(guī)格：500次

產品簡介：

  MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應用 于細胞增殖和細胞毒性的檢測,。MTT 可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物 Formazan,。在特 定溶劑存在的情況下，可以被*溶解,。然后通過酶標儀可以測定 570nm 波長附近的吸光度,。細胞增殖越多越快， 則吸光度越高,；細胞毒性越大,，則吸光度越低。

  本試劑盒采用了*的 Formazan 溶解液配方,，無需去除原有的培養(yǎng)液,，可以直接加入 Formazan 溶解液溶解 Formazan,。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時 Formazan 被部分去除而引起的誤差。

  本試劑盒本底低,，靈敏度高,，線性范圍寬，使用方便,。

  本試劑盒可以測定 500 個樣品,。

包裝清單:

操作步驟：

1. 通常細胞增殖實驗每孔加入 100μl 2000 個細胞,，細胞毒性實驗每孔加入 100μl 5000 個細胞(具體每 孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小,，細胞增殖速度的快慢等決定),。按照實驗需要，進行培養(yǎng)并 給予 0-10μl 特定的藥物刺激,。

2. 每孔加入 20μl MTT 溶液,，在細胞培養(yǎng)箱內繼續(xù)孵育 4 小時。

3. 每孔加入 100μl Formanzan 溶解液,，在細胞培養(yǎng)箱內再繼續(xù)孵育,。直至在普通光學顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn) Formazan 全部溶解。通常 37℃孵育 4 小時左右,，紫色結晶會全部溶解,。如果紫色結晶較小較少，溶解 的時間會短一些,。如果紫色結晶較大較多,，溶解的時間會長一些，建議室溫或 37℃過夜孵育,。

4. 在 570nm 測定吸光度,。如無 570nm 濾光片，可以使用 560-600nm 的濾光片,。

注意事項 ：

1. 由于使用 96 孔板進行檢測,，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題,。一方面,，由于 96 孔板周圍一 圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法,，改加 PBS,、水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠 近培養(yǎng)箱內水源的地方,，以緩解蒸發(fā),。

2. MTT 溶液在 4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,，可以 20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用,。

3. Formazan 溶解液結凍或產生沉淀時可以 37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用,?；?勻過程請用移液槍輕輕吹勻，勿上下顛倒,，避免氣泡,。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操