細(xì)胞活力/毒性檢測    增強(qiáng)型CCK-8試劑盒根據(jù)專有配方配制,，同等用量下的靈敏度為傳統(tǒng) CCK-8 試劑 3~5 倍， 明顯高于國內(nèi)某產(chǎn)品,?？捎糜跈z測細(xì)胞活力，可用于細(xì)胞增殖和毒性分析,，方法簡便而準(zhǔn)確,。

試劑的優(yōu)點：

1、 結(jié)果準(zhǔn)確,，重現(xiàn)性好,，試劑不影響細(xì)胞活力，顯色產(chǎn)物直接溶解于培養(yǎng)液,，直接測定 OD 值即可準(zhǔn)確 反應(yīng)細(xì)胞活力,。

2、 操作省時簡單,，試劑即開即用,，無需配制,；只需一步操作，即可測定,。

3,、 安全性好，不含放射性同位素和有害有機(jī)溶劑,，使用安全,。

4、 靈敏度高,，靈敏度高于 MTT,、XTT 及 CCK-8 等方法，同等用量下的靈敏度為傳統(tǒng) CCK-8 試劑 3~5 倍,。

使用方法：

1,、 使用 96 孔板，細(xì)胞培養(yǎng)和處理完畢,。

2,、 迅速加入增強(qiáng)型 CCK-8 試劑，每孔 100μl 培養(yǎng)基中加入 10μl 增強(qiáng)型 CCK-8 試劑,。

3,、 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育 1~4 小時,。

4、 于 490nm 處測定 OD 值,。 5,、 結(jié)果分析 將各測試孔的 OD 值減去對照孔或調(diào)零孔 OD 值。各平行孔的 OD 值取平均數(shù),。 細(xì)胞活力% =（加藥細(xì)胞 OD-空白 OD）/（對照細(xì)胞 OD-空白 OD）×* 6,、 若使用 96 孔外的培養(yǎng)板，試劑用量等比例增減,。

使用注意事項：

1,、 *使用時，建議先做幾個孔摸索條件,，考察接種細(xì)胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間,。

2、 加入試劑速度要快,，以避免試劑殘留和加樣速度不一所致反應(yīng)時間不同造成的顯色誤差,。有條件的情 況下，建議采用多通道移液器,，可以減少平行孔間的差異,。為避免槍頭上的殘留所帶來的加樣誤差,，增強(qiáng) 型 CCK-8 試劑可在加樣前用培養(yǎng)基稀釋混勻。

3,、 細(xì)胞活力/毒性檢測    增強(qiáng)型CCK-8試劑盒加入后輕輕振搖培養(yǎng)板,，使增強(qiáng)型 CCK-8 試劑與培養(yǎng)基充分混勻。

4,、 試劑加入后培養(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異,。對于貼壁細(xì)胞，加入增強(qiáng)型 CCK-8 的培養(yǎng)時間一般為 1~4 小時,，但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細(xì)胞種類而定）,。 與貼壁細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞較難顯色,。對于懸浮細(xì)胞,，在加入增強(qiáng)型 CCK-8 培養(yǎng) 1~4 小時后，可先從培養(yǎng) 箱中取出,，目測染色程度或用酶標(biāo)儀測定決定,。白細(xì)胞較難顯色，因此需要較長的增強(qiáng)型 CCK-8 反應(yīng)時間 或增加細(xì)胞數(shù)量（10 5個細(xì)胞/孔）,。若顯色困難,，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時后再確定,。

5,、 如果實驗中有還原劑，需要檢查背景的 OD 值,，即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物,，然后加入增強(qiáng)型 CCK-8 試劑在一定時間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較（只加增強(qiáng)型 CCK-8 試劑）,，如果 OD 值明顯 偏高,，則說明有反應(yīng)。

6,、 若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色或 pH 發(fā)生變化,，建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入增強(qiáng)型 CCK-8 試 劑。含有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用,。

7,、 如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液，建議設(shè)定 600nm（或 600nm 以上）作為參比波長,，扣除參比波長的 OD 值即可,。

8、 如果要測定細(xì)胞的具體數(shù)量,，需要先做一個標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

9,、 若測得 OD 值過高，可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或增強(qiáng)型 CCK-8 試劑用量,。

試劑包裝：

100 次：1ml×1 瓶,；

500 次：5ml×1 瓶；

3,000 次：5ml×6 瓶,；

5,000 次：5ml×10 瓶,；

10,000 次：100ml×1 瓶。

貯藏條件：

增強(qiáng)型 CCK-8 在避光 0~5℃的條件下可存放一年,，測定效果*不變,。在-20℃的條件下可以貯存更久。 反復(fù)凍融會增加背景值,，經(jīng)常使用時請于 0~5℃條件下保存,。

本產(chǎn)品僅供科研使用，不做其它用途,。