詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7144 |
細胞簡介:
兔子宮平滑肌分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂,。子宮肌層比較厚,,由成束或成片的平滑肌組成,肌束間以結(jié)締組織分隔,。子宮平滑肌具有收縮功能,,收縮受激素的調(diào)節(jié),其收縮活動有助于向輸卵管運送,、經(jīng)血排出以及胎兒娩出,。子宮平滑肌層含有大量的血管,如果平滑肌層細胞過度生長,,勢必造成血管壁的增厚,,管腔堵塞,體外培養(yǎng)平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制,。子宮平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。子宮平滑肌細胞的主要功能:①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),,在孕期能的擴張子宮容積,,保證胎兒孕育環(huán)境;②平滑肌細胞有收縮舒張能力,,在生產(chǎn)時能形成生理性的縮腹環(huán),,推動胎兒向下移動,輔助生產(chǎn),。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔子宮平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔子宮平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA.
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISAKit ELISA.
豬胰島素(INS)ELISAKit ELISA.
豬血小板活化因子(PAF)ELISAKit ELISA.
豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒
Human creatine kinase (CK) ELISA Kit 人肌酸激酶(CK)試劑盒
RabbitD-Dimer,D2DELISAKit 兔子D二聚體(D2D)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-RVIgG(Humanai-rubellavirusIgGaibody)ELISAKit人抗風疹病毒IgG抗體
血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性間接比色法定量試劑盒20次
PorcineInsulin,INSELISAKit豬胰島素(INS)試劑盒
FSCB蛋白抗體
天連接糖基化11抗體
KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標簽) Protein
TGFβ誘導早期應(yīng)答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)
RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標簽) Protein
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽)
MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白
C4結(jié)合蛋白β(C4BPβ)重組蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽)
ADAM15重組小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 標簽) Protein
DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 標簽)
LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 Protein
兔子宮平滑肌細胞大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒 ,,英文名: APC ELISA Kit
Rabbit Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 兔鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒
腦膜奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神經(jīng)絲蛋白
體液(GLATHIONE)總濃度熒光定量試劑盒50次
ELISAKitColⅡ人Ⅱ型膠原