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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8321 |
細胞簡介：
兔表皮角化分離自皮膚組織,；表皮位于動物皮膚的外層,，由胚胎時期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結構,，由復層扁平上皮構成,。從基底層到表面可分為五層,，即基底層,、棘層、顆粒層,、透明層和角質層,。表皮角化細胞（KC）是構成表皮的主要細胞成分，在體內處于不斷增殖過程中,，分裂的角化細胞主要位于其基底層,，少數(shù)位于棘細胞層。隨著向表層的推移,，細胞的分化程度逐漸增加,，并喪失分裂活性。
方法簡介：
實驗室分離的兔表皮角化上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測：
實驗室分離的兔表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右,；2代以內狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔表皮角化上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品：
五羥色胺 (Serotonin/5-HT) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
分泌型白細胞蛋白酶抑制物 (SLPI) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
P 物質 (Substance P) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
生存素 (survivin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒
Tacrolimus (FK506) ELISA Kit 人(FK506)試劑盒
HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人單皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)試劑盒 進口分裝
HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORs試劑盒人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒
植物源性食品芥麥(Buckwheat)試劑盒20次
Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人活化調節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)試劑盒
P選擇素糖蛋白配體1抗體
戊二酰脫氫酶抗體
CD83重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標簽) Protein
A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40
ABHD14B重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標簽) Protein
FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標簽)
IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)
FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標簽)
GREM1重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽) Protein
TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標簽)
CFL1重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標簽) Protein
兔表皮角化上皮細胞大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)試劑盒 ,，英文名： BACE1 ELISA Kit
Mouse esogen (E) ELISA Kit 小鼠雌激素(E)試劑盒
ELISA 小鼠神經(jīng)肽Y(mouse NPY) 進口分裝
CLIAKitforIL-13ELISAKIT大鼠白介素13
通用型馬鈴薯YN病毒(PotatoVirusYN;PVYN)試劑盒20次
ELISAKitANG-2大鼠血管生成素2
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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