詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7136 |
細胞簡介:
兔子宮成纖維分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,,位于盆腔中部,,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,,這些結構受損或松弛時,,可以引起子宮脫垂。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,;成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的子宮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。子宮成纖維細胞的主要特征:①是子宮的重要細胞組成,,在體外易于培養(yǎng),;②在子宮損傷后能修復和重塑子宮,;③在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴散。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔子宮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
乙二醇-雙-(2-基乙基)四乙酸 10g
EGTA 50g
伊紅Y 25g
EosinY,SodiumSalt 10x25g
鴨子胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒
Human ai Saccharomyces cerevisiae aibody (ASCA) ELISA Kit 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)試劑盒
HumanMelatonin,MTELISAKit 人褪黑素(MT)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforACV-RAb(Ratai-ActivinAreceptoraibody,ACV-RAb)ELISAKit大鼠活化素A受體抗體
血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒
FITC標記人CD69單克隆抗體
胎盤表達轉(zhuǎn)錄因子1蛋白抗體
NCKIPSD重組人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 標簽) Protein
Skp2 peptide 細胞S相激酶相關蛋白抗原 0.5mgSkp2 peptide 細胞S相激酶相關蛋白抗原
TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CALCA Protein Human 重組人 CALCA / CGRP 蛋白
LTA4H Protein Human 重組人 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標簽)
Skp2 peptide 細胞S相激酶相關蛋白抗原 0.5mgSkp2 peptide 細胞S相激酶相關蛋白抗原
CALCA Protein Human 重組人 CALCA / CGRP 蛋白
NCKIPSD重組人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 標簽) Protein
LTA4H Protein Human 重組人 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標簽)
TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
兔子宮成纖維細胞大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)試劑盒 ,,英文名: ACV-RAb ELISA Kit
Rabbit compleme 3 (C3) ELISA Kit 兔補體蛋白3(C3)試劑盒
鼠疫桿菌(YP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽
體液谷同酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量試劑盒20次
ELISAKitPⅢ人Ⅲ型前膠原氨基端肽
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行