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兔胰島細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 09:50:11瀏覽次數(shù):205

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7875 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
兔胰島細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:LUC7L2蛋白抗體 鋅指蛋白903抗體 核自身抗原SP140抗體 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 人肺微血管平滑肌 MOLM-14人急性髓系白血病細(xì)胞 H4 (人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

兔胰島細(xì)胞

兔胰島細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

胰腺

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

梭形、多角形

YS-01X7875

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔胰島分離自胰腺組織,;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,,腺泡分泌胰液,,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有,、原,、脂肪酶、等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖,;β細(xì)胞分泌胰島素,,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,,以旁分泌的方式抑制α,、β細(xì)胞的分泌,;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng),、胰液分泌和膽囊收縮,。胰島細(xì)胞作為糖尿病新藥的細(xì)胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長(zhǎng)的存活時(shí)間,。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%,,每個(gè)胰島大概含有1000個(gè)細(xì)胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴(yán)重低血糖癥狀,,具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點(diǎn),,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選,、胰腺消化,、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟,分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇,。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰島采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰島經(jīng)DTZ染色檢測(cè),,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO25%

兔胰島體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

兔胰島細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

兔胰島細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

鴨病毒性腸病毒(DEV)試劑盒   96T/48T

鴨白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒   96T/48T

鴨白介素6(IL-6)試劑盒   96T/48T

鴨白介素4(IL-4)試劑盒   96T/48T

小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai zona pellucida aibody (aZP) ELISA Kit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒

Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit 人γ谷氨酰半胱合成酶(γ-ECS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACA-IgM(Mouseai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgM

藥品糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量試劑盒20

Mouseoxytocin,OTELISAKit小鼠催產(chǎn)素(OT)試劑盒規(guī)格:96T/48T

DNA交聯(lián)修復(fù)蛋白1C抗體

生物鐘蛋白3抗體

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor 0.5mgLH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黃體生成素受體抗原

RTN4重組人 RTN4 / NOGO-A 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CASQ1 Protein Human 重組人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白

CTSS Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin S / CTSS 蛋白

LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor 0.5mgLH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黃體生成素受體抗原

CASQ1 Protein Human 重組人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CTSS Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin S / CTSS 蛋白

RTN4重組人 RTN4 / NOGO-A 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

兔胰島細(xì)胞大鼠肌紅蛋白(MB)試劑盒 ,英文名: MB ELISA Kit

Rabbit 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒

對(duì)蝦皮下和造血器官壞死病毒(HHNV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌鈣蛋白T

體液鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量試劑盒20

ELISAKit8-OHdG8羥基脫氧鳥苷

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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