詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8134 |
細(xì)胞簡介:
兔胎盤間充質(zhì)分離自胎盤組織,;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一種多能干細(xì)胞,,是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞,。在一定條件下,它可以分化成多種功能細(xì)胞像APSC多能細(xì)胞,。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層,。在機體正常的組織損傷修復(fù)過程中,MSC是一種重要的參與組織再生的細(xì)胞庫,。在組織損傷引起的特殊信號作用下,,MSC遷移到受損部位,在局部聚集增殖,,依據(jù)不同的損傷信號沿著不同途徑分化,。MSC易于分離擴增,體外倍增能力旺盛,,能保持其多向分化能力,。因此,MSC是一種實用的組織修復(fù)種子細(xì)胞,。相較于其他干細(xì)胞,,胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞具有來源方便,細(xì)胞數(shù)量充足,,易于分離,、培養(yǎng)、擴增和純化,,傳代擴增多代后仍具有干細(xì)胞特性,。胎盤是干細(xì)胞的優(yōu)良來源。
方法簡介:
實驗室分離的兔胎盤間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔胎盤間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔胎盤間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠絨毛膜(CG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠二(MDA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit E(IgE)試劑盒
HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit 人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Equineamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40試劑盒馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量試劑盒20次
MouseCrosslaps,CrELISAKit小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF647標(biāo)記的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體
趨化因子26/嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白3抗體
Spike重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein
TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)
IL10RB重組人 IL10Rb 蛋白 Protein
CNPY3 Protein Human 重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NTRK3 Protein Human 重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)
CNPY3 Protein Human 重組人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Spike重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein
NTRK3 Protein Human 重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
IL10RB重組人 IL10Rb 蛋白 Protein
兔胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠間羥(MN)試劑盒 ,,英文名: MN ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒
RatADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFETU-A(HumanFetuinA)ELISAKit人胎球蛋白A
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行