詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱:兔輸卵管上皮細(xì)胞
組織來源:輸卵管
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔輸卵管上皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
兔輸卵管上皮分離自輸卵管組織;輸卵管位于子宮底兩側(cè),,包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi),。自子宮兩角分別伸展至左,、右卵巢,,是輸送卵細(xì)胞進(jìn)入子宮的管道,也是卵受精的場所,。輸卵管主要分漏斗部,、壺腹部、峽部和子宮部,,管壁均由粘膜,、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞,,壺腹部的皺襞,,高而多分支,故管腔不規(guī)則,;至子宮部的皺襞漸減少,。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細(xì)胞和分泌細(xì)胞組成,。纖毛細(xì)胞以漏斗部和壺腹部最多,,至峽部和子宮部逐漸減少,纖毛向子宮方向擺動,,使卵移向子宮并阻止病菌進(jìn)入腹膜腔.分泌細(xì)胞表面有微絨毛,,頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒,其分泌物構(gòu)成輸卵管液,。輸卵管上皮細(xì)胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下,,隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進(jìn)輸卵管上皮細(xì)胞的生長的功能活動,,在子宮內(nèi)膜增生晚期(排卵前),。纖毛細(xì)胞變成高柱狀,纖毛增多,,分泌細(xì)胞頂部充滿分泌顆粒,,功能旺盛。至分泌晚期,,兩種細(xì)胞均變矮,,分泌細(xì)胞的分泌顆粒排空,纖毛細(xì)胞的纖毛也減少,。
方法簡介:
實驗室分離的兔輸卵管上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔輸卵管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
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小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin G, Fc segme receptor (Fc gamma R I /CD64) ELISA Kit G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)試劑盒
HumanAquaporin4,AQP-4ELISAKit 人水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
EquineBeta-Endorphin,β-EP試劑盒馬β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母S腺苷同型半胱核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)試劑盒規(guī)格:96T/48T
9號染色體開放閱讀框75抗體
親核素β1抗體
HAVCR1重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3 0.5mgHrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原
FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein
CNPY4 Protein Human 重組人 CNPY4 蛋白
IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3 0.5mgHrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原
CNPY4 Protein Human 重組人 CNPY4 蛋白
HAVCR1重組大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
FAM45A重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白 Protein
兔輸卵管上皮細(xì)胞大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF2)試劑盒 ,,英文名: FGF2 ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒
Ratisletcellaibody,ICAELISAKit 大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFFA(Humanfreefattyacids)ELISAKit人游離脂肪酸
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)
RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit大鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒規(guī)格:96T/48T