化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腎上腺 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X8140 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔腎上腺皮質(zhì)分離自腎上腺組織,；腎上腺是機(jī)體相當(dāng)重要的內(nèi)分泌器官,，由于位于兩側(cè)腎臟的上方，故名腎上腺,。腎上腺左右各一,，位于腎的上方，共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹,。左腎上腺呈半月形,，右腎上腺為三角形,。從側(cè)面觀察，腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,，周圍部分是皮質(zhì),，內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,，分泌腎上腺素和,。這些激素在應(yīng)激狀態(tài)釋放增多，能夠幫助升高血壓,，加快心率,，升高血糖，動(dòng)員全身的儲(chǔ)備物質(zhì),，為機(jī)體與外界環(huán)境的抗?fàn)幾骱贸浞譁?zhǔn)備,。腎上腺外部是皮質(zhì)部分，分泌醛固酮,、和少量的雌雄激素,。醛固酮能夠促進(jìn)小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收，正常數(shù)量的醛固酮,，對(duì)維持機(jī)體正常血壓有重要作用,。但是如果過多分泌，會(huì)導(dǎo)致高血壓和低血鉀,。是機(jī)體必需的激素之一,。當(dāng)機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，比如感冒,，發(fā)燒,，遇到突發(fā)事件的時(shí)候，腎上腺皮質(zhì)分泌大量的,，這些能夠動(dòng)員機(jī)體的存儲(chǔ)能源,，為應(yīng)對(duì)內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。當(dāng)缺乏時(shí),，機(jī)體在遇到重大事件的時(shí)候，往往缺乏足夠應(yīng)對(duì)能力,，容易被病毒或外界壓力所擊倒,。腎上腺產(chǎn)生的雄激素，對(duì)雄性來講,，并非,，但是對(duì)雌性而言，是雄激素的一個(gè)重要來源,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎上腺皮質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎上腺皮質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、多角形
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔腎上腺皮質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
兔子結(jié)合蛋白4試劑盒 兔子結(jié)合蛋白4試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子結(jié)合蛋白4試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔子結(jié)合蛋白4試劑盒,、兔子結(jié)合蛋白4eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔子透明質(zhì)酸試劑盒 兔子透明質(zhì)酸試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子透明質(zhì)酸試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子透明質(zhì)酸試劑盒,、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
人血管緊張素原試劑盒 人血管緊張素原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人血管緊張素原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人血管緊張素原試劑盒、人血管緊張素原eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒
Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
1號(hào)染色體開放閱讀框135抗體
內(nèi)皮單核細(xì)胞激活肽2抗體
IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)
TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein
GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白
S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白
NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)
GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白
IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白
TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein
兔腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞大鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)試劑盒 ,，英文名： MCP-1/CCL2 ELISA Kit
Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒
MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽
同位素標(biāo)記放射活性離心柱試劑盒20次
ELISAKitpERK大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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