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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腦 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 球形 | YS-01X7997 |
細(xì)胞簡介：
兔神經(jīng)干分離自腦皮層組織,；大腦分左右兩個半球,，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分,，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個半球都有三個面,，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）,；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質(zhì)組分為額葉,、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力,，能自我更新，并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群,。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞,，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強調(diào)的是,，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,，不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同，分布也不同,。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種,，它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能,，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力,，這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力,。神經(jīng)干細(xì)胞在疾病,、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,，并向神經(jīng)細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點,，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提,。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球,，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長,，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細(xì)胞懸液,，將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,，2×105個細(xì)胞/瓶，每7-10d傳代1次,，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,，培養(yǎng)條件不變。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
實驗室分離的兔神經(jīng)干采用消化后差速貼壁，結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement,、EGF、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：球形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔神經(jīng)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠C-肽 英文名稱： C-peptide 規(guī)格： 英文縮寫： C-peptide
小鼠心肌肌鈣蛋白 英文名稱： cardiac oponin 1 規(guī)格： 英文縮寫： cTn1
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子 英文名稱： granulocyte colony-stimulating factor 規(guī)格： 英文縮寫： G-CSF
小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 英文名稱： granulocyte-macrophage colony-stimulating factor 規(guī)格： 英文縮寫： GM-CSF
小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human retinoblastoma tumor suppressor protein (pRB) ELISA Kit 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒
HumanleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 人白三烯D4(LTD4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-septolysinO,ASO試劑盒人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物纖維素酶(cellulase)活性比色法定量試劑盒20次
HumanoponinⅠ,，Tn-ⅠELISAKit人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
17號染色體開放閱讀框78抗體
腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體
HA重組甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide 0.5mgPAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽
VEGFA重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白 Protein
FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白
CD80 Protein Human 重組人 CD80 / B7-1 蛋白
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide 0.5mgPAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽
FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白
HA重組甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CD80 Protein Human 重組人 CD80 / B7-1 蛋白
VEGFA重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白 Protein
兔神經(jīng)干細(xì)胞大鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
Mouse haptoglobin / haptoglobin (Hpt/HP) ELISA Kit 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒
Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺病毒IgG
同位素標(biāo)記放射活性TCA試劑盒20次
ELISAKitAMPK大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶
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