詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔乳腺上皮細(xì)胞
組織來源:乳腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
兔乳腺上皮分離自乳腺組織;乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,,主要由腺上皮細(xì)胞組成,,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,,導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡,;近年來的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系,,體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟,。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,,腺泡是分泌乳汁的重要部分,。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控,其中乳腺表達(dá)的生長因子對乳腺上皮細(xì)胞的增殖,、分化,、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織,,為貼壁生長型細(xì)胞,,呈多角形、圓形以及短梭形,;乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠促上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Active Caspase-3 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Active Caspase-7 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Active Caspase-8 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒
HumanAttacinELISAKit 人抗菌肽(Attacin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-EJ-aibody,EJ/GlyRS試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感比色法定量試劑盒20次
HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
層粘連蛋白受體1重組兔單克隆抗體
鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體
FGFR4重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原 0.5mgCDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原
AK2重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ELK1 Protein Human 重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原 0.5mgCDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原
ELK1 Protein Human 重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FGFR4重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
AK2重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
兔乳腺上皮細(xì)胞大鼠巨噬細(xì)胞來源趨化因子(MDC)試劑盒 ,,英文名: MDC ELISA Kit
Mouse lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒
Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFN(MouseFibronectin)ELISAKit小鼠纖連蛋白
細(xì)胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量試劑盒25次
RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作