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兔前脂肪細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 08:57:51瀏覽次數(shù):171

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7100 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
兔前脂肪細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:LIX1抗體 細(xì)胞間粘附蛋白Vinexin抗體 晶狀體發(fā)育相關(guān)蛋白Six3抗體 兔腎小球系膜細(xì)胞 人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞 NCI-H2085人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 LoVo (人結(jié)腸癌細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

兔前脂肪細(xì)胞

兔前脂肪細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

脂肪組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7100

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔前脂肪分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性、血壓水平,、內(nèi)皮功能,、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過(guò)程,;脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng),。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞,。前脂肪細(xì)胞呈梭形,,有分裂和增殖的能力,;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力,。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,,與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,,在演變的過(guò)程中不斷吸收脂質(zhì),,最終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng),,可望成為軟組織缺損的有益填充物,。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔前脂肪采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測(cè),,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

兔前脂肪細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔前脂肪細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

生化試劑盒

谷酰胺測(cè)試盒   Glamine test kit

谷酸測(cè)試盒   Glamate test kit

谷酰胺,、谷酸(兩種均可測(cè))   Glamine and glamic acid (two can be measured)

豚鼠調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RAES)試劑盒 ,,英文名: RAES ELISA Kit

Human secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) ELISA Kit 人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)試劑盒

rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 兔子巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBCDF(HumanBcelldifferetiationfactor)ELISAKitB細(xì)胞分化因子

纖維素分解活力(FIBRINOLYTIC)試劑盒20

RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit兔子膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒規(guī)格:96T/48T

丙酮酸脫氫酶E2抗體

球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1抗體

CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

神經(jīng)束蛋白(NFASC)重組蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC)

ARF1重組人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein

IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

神經(jīng)束蛋白(NFASC)重組蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC)

IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白

CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

ARF1重組人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein

兔前脂肪細(xì)胞大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP5)試劑盒 ,英文名: MIP5 ELISA Kit

Monkey acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒

RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFRA(Humanfibronectioelatedaigen)ELISAKit人纖維連接素相關(guān)抗原

細(xì)胞肌酸激酶(CK)活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒25

RatPhosphorylatedacetyl-CoAcatboxylase,pACCaseELISAKit大鼠0酸化乙酰羧化酶(pACCase)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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