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本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱(chēng)：兔氣管平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源：氣管
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔氣管平滑肌分離自氣管組織,；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分,；為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連,；向下至第四,、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左,、右主支氣管,，分叉處稱(chēng)為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,，有彈性,，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開(kāi)狀態(tài),。管腔襯以粘膜,，表面覆蓋纖毛上皮,，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,，以?xún)艋氲臍怏w,。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,；能夠保持氣道張力,，維持氣道管狀形態(tài)，從而有利于氣體流通,，保持肺部通氣,。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生,、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
生長(zhǎng)分化因子-3 英文名稱(chēng)： growth differeiation factor 3 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： GDF-3
膠質(zhì)纖維酸性蛋白 英文名稱(chēng)： glial fibrillary acidic protein 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： GFAP
生長(zhǎng)激素釋放多肽Ghrelin 英文名稱(chēng)： peptide hormone Ghrelin 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： Ghrelin
胰高血糖素 英文名稱(chēng)： Glucagon 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： GC
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)試劑盒
HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISAKit 人胞漿型0脂酶A2(cPLA2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancrystalproteinsβ,Cryβ試劑盒人晶體蛋白β(Cryβ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性試劑盒20次
HumanProstaglandinDSyhase,PGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
白細(xì)胞介素-19抗體
酶2抗體
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽6-38
LILRB3重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白
ACE2 Protein Human 重組人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽6-38
IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
ACE2 Protein Human 重組人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LILRB3重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
兔氣管平滑肌細(xì)胞大鼠抗存活素抗體(Ai-Surv)試劑盒 ,，英文名： Ai-Surv ELISA Kit
Monkey adrenomedullin (ADM) ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒
RatCompleme4,C4ELISAKit 大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFree-T3(HumanFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit人游離三甲狀腺原
細(xì)胞活化10(FACTORXa)活性熒光定量試劑盒20次
Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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