兔脾淋巴細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：LIP5抗體 血管粘附蛋白1抗體 SH3結(jié)構(gòu)域激酶結(jié)合蛋白1抗體 兔前脂肪細(xì)胞 人卵巢癌組織源細(xì)胞 NCI-H2196人小細(xì)胞肺癌 MOLT-4 (人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)

本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！

產(chǎn)品名稱(chēng)：兔脾淋巴細(xì)胞

組織來(lái)源：脾臟

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

兔脾淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔脾淋巴分離自脾臟組織,；脾臟是機(jī)體最大的免疫器官,，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心,。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對(duì),，長(zhǎng)軸與第10肋一致,。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃,，后方與左腎,、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰,，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官,。淋巴細(xì)胞（lymphocyte）白細(xì)胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生,，機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異，可分為中樞淋巴器官（又名初級(jí)淋巴器官）和周?chē)馨推鞴伲ㄓ置渭?jí)淋巴器官）兩類(lèi),。前者包括胸腺,、腔上囊或其相當(dāng)器官（有人認(rèn)為在哺乳動(dòng)物是骨髓）。它們無(wú)須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細(xì)胞,，成熟后將其轉(zhuǎn)送至周?chē)馨推鞴?。后者包括脾、淋巴結(jié)等,。成熟淋巴細(xì)胞需依賴(lài)抗原刺激而分化增殖,，繼而發(fā)揮其免疫功能。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔脾淋巴采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為1×106cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔脾淋巴經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

兔乙酰(ACh)試劑盒   96T/48T

兔合成酶(NOS)試劑盒   96T/48T

兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒   96T/48T

兔血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)試劑盒   96T/48T

小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)試劑盒

Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancholesterol,CH試劑盒人(CH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

紫外線(xiàn)處理DNA損傷彗星熒光試劑盒20次

HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

γ-谷氨酰羧化酶抗體

磷酸化腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA1抗體

CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein

Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)

ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein

GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)

GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白

CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein

兔脾淋巴細(xì)胞大鼠顆粒酶A(GZMA)試劑盒 ,，英文名： GZMA ELISA Kit

Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒

RatPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFSH促卵泡生成素

細(xì)胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量試劑盒20次

RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作