詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔膀胱成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源:膀胱組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔膀胱成纖維分離自膀胱組織,;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,,在哺乳類動(dòng)物,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),,位于骨盆內(nèi),,其后端開(kāi)口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,,可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成,,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,,可使膀胱內(nèi)壓升高,,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,,形成尿道內(nèi)括約肌,。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織),、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織),。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的膀胱成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦,、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過(guò)程,。近年來(lái),堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在膀胱癌發(fā)病過(guò)程中的作用,、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔膀胱成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔膀胱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸試劑盒 48T
綠膿桿菌(PA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
綠膿桿菌(PA)核酸試劑盒 48T
腸道病毒EV71核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
,,英文名: HB ELISA Kit
Human secretory compone (SC) ELISA Kit 人分泌成分(SC)試劑盒
rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBcl-2(HumanB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKit人B細(xì)胞淋巴瘤因子2
纖維蛋白溶酶原激活劑抑制物(PAI)活性比色法定量試劑盒20次
RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格:96T/48T
α -新內(nèi)啡肽抗體
磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體
AXL重組小鼠 Axl Kinase 蛋白 Protein
cath-B/CB(Cathepsin B 0.5mgcath-B/CB(Cathepsin B) 組織蛋白酶B抗原
BCAM重組人 BCAM 蛋白 Protein
IGSF3 Protein Human 重組人 IGSF3 / EWI-3 蛋白
SPN Protein Rat 重組大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
cath-B/CB(Cathepsin B 0.5mgcath-B/CB(Cathepsin B) 組織蛋白酶B抗原
IGSF3 Protein Human 重組人 IGSF3 / EWI-3 蛋白
AXL重組小鼠 Axl Kinase 蛋白 Protein
SPN Protein Rat 重組大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BCAM重組人 BCAM 蛋白 Protein
兔膀胱成纖維細(xì)胞大鼠顆粒酶M(GZMM)試劑盒 ,英文名: GZMM ELISA Kit
Monkey endotoxin (ET) ELISA Kit內(nèi)毒素(ET)試劑盒
Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFSHPoulyELISAKitFSH禽類酶聯(lián)免疫試劑盒
細(xì)胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE)總活性比色法定量試劑盒20次
RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒規(guī)格:96T/48T