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兔結腸成纖維細胞

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更新時間:2024-10-31 13:37:12瀏覽次數(shù):217

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7973 主要用途 僅供科研研究實驗
兔結腸成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:LHX3蛋白抗體 四分子交聯(lián)體4/四旋蛋白4/四次跨膜蛋白4抗體 Sema6A抗體 兔腦膜細胞 人肝外膽管上皮細胞 NCI-H647人非小細胞肺癌細胞 RD (人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)

詳細介紹

兔結腸成纖維細胞

兔結腸成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

結腸

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7973

細胞簡介:

兔結腸成纖維分離自結腸組織,;結腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸,、橫結腸,、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,,結腸的排列酷似英文字母“M",,將小腸包圍在內(nèi)。結腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層,、固有層,、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),,肌層(內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜),。結腸成纖維細胞主要分布于外膜(纖維膜或漿膜)結締組織內(nèi),。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的結腸成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡介:

實驗室分離的兔結腸成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔結腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS,、bFGF,、InsulinPenicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%CO2,,5%

兔結腸成纖維體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

兔結腸成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔結腸成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ活性測試盒   可見分光光度法   25/24

線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ活性測試盒   可見分光光度法   25/24

線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ活性測試盒   可見分光光度法   25/24

α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒   紫外分光光度法   50/48

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒

Rat endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒

Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)試劑盒 進口分裝

HumanapoproteinB100,apo-B100試劑盒人載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒

植物葉綠體總蛋白定量試劑盒20

Humaissue-typePlasiminogenActilyse,,t-PAELISAKit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒

RNA相關結合蛋白MCG10抗體

磷酸化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶抗體

IL36A重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein

ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原

PROK1重組人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 標簽) Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated

EPHA4 Protein Rat 重組大鼠 EphA4 蛋白

ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關蛋白抗原

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated

IL36A重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Rat 重組大鼠 EphA4 蛋白

PROK1重組人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 標簽) Protein

兔結腸成纖維細胞大鼠類固醇5α還原酶2(SRD5α2)試劑盒 ,,英文名: SRD5α2 ELISA Kit

Mouse free three iodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 小鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)試劑盒

Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforGABAELISAKit大鼠γ氨基

細胞過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量試劑盒20

RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受體(PROGR)試劑盒

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;

  2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;

  3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;

  4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;

  5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。


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