詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔肌腱成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源:肌腱組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,;
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔肌腱成纖維分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,,便于肌肉附著和固定,。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動(dòng)不同骨的運(yùn)動(dòng),。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,,有收縮能力,,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,,沒(méi)有收縮能力,。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長(zhǎng)肌的肌腱多呈圓索狀,,闊肌的肌腱闊而薄,,呈膜狀,又叫腱膜,。此處的肌腹即為通常所說(shuō)的紅肌,,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量,、爆發(fā)力和耐力,。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),;成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌腱成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌腱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgMELISA Kit 大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM試劑盒
humahyroid-stimulatinghormonereceptoraibody,TSHRELISAKit 人促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-neuophilaibody,ANA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)10次
humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PE標(biāo)記小鼠CD49e單克隆抗體
酪激酶A抗體
SERPINB8重組小鼠 SerpinB8 蛋白 Protein
BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A 0.5mgBMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原
NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
F13B Protein Human 重組人 Coagulation Factor XIII B chain / F13B 蛋白
CD276 Protein Rat 重組大鼠 B7-H3 / CD276 蛋白
BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A 0.5mgBMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原
F13B Protein Human 重組人 Coagulation Factor XIII B chain / F13B 蛋白
SERPINB8重組小鼠 SerpinB8 蛋白 Protein
CD276 Protein Rat 重組大鼠 B7-H3 / CD276 蛋白
NRG1重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
兔肌腱成纖維細(xì)胞大鼠連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)試劑盒 ,,英文名: CTNNβ1 ELISA Kit
Mouse inhibin B (INH-B) ELISA Kit 小鼠抑制素B(INH-B)試劑盒
RathighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGal(HumanAlpha-galactoyl)ELISAKit人α半乳糖基抗體
細(xì)胞胱(cystine)含量比色法定量試劑盒20次
RatProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit大鼠前列腺素F2α(PGF2α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作