詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
海綿體 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7954 |
細(xì)胞簡介:
兔海綿體平滑肌分離自海綿體組織,;海綿體,又稱海綿體肌,,是最硬的平滑肌和結(jié)締組織,。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅(jiān)厚的白膜,,內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,,其腔隙與血管相通,。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分,。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,,在消化海綿體組織時(shí),膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接,。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌,,是非橫紋肌的肌肉組織,。分布在人體動(dòng)脈和靜脈血管壁、膀胱,、子宮,、男性和女性生殖道、消化道,、呼吸道,、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀,;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔海綿體平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔海綿體平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠P物質(zhì)試劑盒 小鼠P物質(zhì)試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠P物質(zhì)試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠P物質(zhì)試劑盒,、小鼠P物質(zhì)eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠p53試劑盒 小鼠p53試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠p53試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠p53試劑盒,、小鼠p53eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠N端前腦素試劑盒 小鼠N端前腦素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠N端前腦素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠N端前腦素試劑盒、小鼠N端前腦素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠L選擇素試劑盒 小鼠L選擇素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠L選擇素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠L選擇素試劑盒,、小鼠L選擇素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat Mueller tube inhibitory substance / ai Mueller tube hormone (MIS/AMH) ELISA Kit 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒
HumanC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 人C型尿肽(CNP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-rabiesvirusaibody,ai-RV試劑盒人抗狂犬病毒抗體(ai-RV)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化酶活性測定試劑盒20次
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
PE-Cy5標(biāo)記人CD55單克隆抗體
顆粒酶B抗體
CLEC1A重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GIP (Gastric Inhibitory polypeptide 0.5mgGIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽(抗原)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein
FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)
GIP (Gastric Inhibitory polypeptide 0.5mgGIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽(抗原)
FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CLEC1A重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein
兔海綿體平滑肌細(xì)胞大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn)試劑盒 ,,英文名: Lptn ELISA Kit
Mouse hepatitis B core aibody (HBcAb) ELISA Kit 小鼠乙型肝核心抗體(HBcAb)試劑盒
RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGATA4ELISAKitmuman人GATA結(jié)合蛋白4試劑盒
細(xì)胞合成酶活性比色法定量試劑盒20次
RatP-SelectinELISAKit大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。