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參考價(jià)	￥1-￥6200	/件

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào)	YS-01X7772	主要用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：附睪特異蛋白6抗體 FLJ37543蛋白抗體抑癌蛋白UBIAD1抗體兔肌源性干細(xì)胞人臍帶血單核細(xì)胞 NUGC-4人胃癌細(xì)胞 SK-N-SH (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞

兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞

商品屬性：

組織來(lái)源	產(chǎn)品規(guī)格	細(xì)胞形態(tài)	貨號(hào)
腦海馬體	5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶	神經(jīng)元細(xì)胞樣	YS-01X7772

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔海馬神經(jīng)元分離自海馬體,；海馬體(Hippocampus)，又名海馬回,、海馬區(qū),、大腦海馬，海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí),。海馬神經(jīng)元細(xì)胞是海馬區(qū)的主要細(xì)胞組成,，主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié),、是老年性癡呆,、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),，在學(xué)習(xí),、記憶、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細(xì)胞聚集區(qū),，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對(duì)獨(dú)立分布的特點(diǎn)，境界相對(duì)清晰,，便于取材,，因此,，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究者當(dāng)做理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀：ｑR神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細(xì)胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用(細(xì)胞因子)的有效細(xì)胞模型,，其在神經(jīng)生物學(xué),，發(fā)育生物學(xué)體外實(shí)驗(yàn)研究中已被廣泛應(yīng)用。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4,、胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；

　　5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔海馬神經(jīng)元采用消化法,、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔海馬神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液：0.125%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

兔海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存：

細(xì)胞傳代步驟

細(xì)胞凍存步驟

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞