化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
股骨,、脛骨 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7064 |
細胞簡介：
兔骨內膜間充質干分離自股骨,、脛骨,；骨內膜是一層致密結締組織膜，覆蓋在骨的表面（關節(jié)面除外）,，新鮮骨內膜呈粉紅色,，含有豐富的血管、神經和成骨細胞,。此外,，附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內膜編織在一起。因而骨內膜與骨質結合甚為牢固,。骨內膜富含血管,、神經，通過骨質的滋養(yǎng)孔分布于骨質和骨髓,。骨內膜分內,、外兩層，外層主要是粗大的膠原纖維束,，部分纖維穿入骨質,，使骨內膜固定于骨面；內層疏松,，含成骨細胞和破骨細胞（分別具有產生新骨質和改建骨的功能）,。骨髓腔和骨松質的網眼也襯著一層菲薄的結締組織膜，叫做骨膜,。骨內膜的內層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,，以形成新骨質和破壞、改造已生成的骨質,，所以對骨的發(fā)生,、生長、修復等具有重要意義,。骨內膜間充質干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,，可以向骨、軟骨,、肌組織,、皮膚、脂肪,、神經等多種組織分化,，因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內膜間充質干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,，在培養(yǎng)過程中,，受貼壁時間、種植密度,、血清含量,、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
方法簡介：
公司實驗室分離的兔骨內膜間充質干采用沖洗骨髓,、消化骨內膜,、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測：
公司實驗室分離的兔骨內膜間充質干經CD90免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISAKit ELISA.
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISAKit ELISA.
小鼠白介素2(IL-2)ELISAKit ELISA.
小鼠白介素4(IL-4)ELISAKit ELISA.
小鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒
Human varicella zoster virus IgM (VZV-IgM) ELISA Kit 人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)試劑盒
HumanFibrinogen,FbgELISAKit 人血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 進口分裝
HumanAi-ypsin,AT試劑盒人抗(AT)試劑盒
植物氧化應激活性氧(ROS)比色法定量試劑盒(羥自由基)20次
humananGSlaminase2Cpolypeptide,，TGM2ELISAKit人轉酶2C多肽(TGM2)試劑盒
mRNA前體剪接因子PRPF8抗體
角蛋白相關蛋白KCP2抗體
FCGR1重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein
ADCY1 peptide 腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原 0.5mgADCY1 peptide 腺苷酸環(huán)化酶1多肽抗原
SAA4重組人 SAA4 蛋白 (GST 標簽) Protein
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽)
EGFR Protein Rat 重組大鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標簽)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽)
ENTPD1重組小鼠 CD39 / ENTPD1 蛋白 (His 標簽) Protein
SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
CD300LG重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白 Protein
兔骨內膜間充質干細胞大鼠酶Ⅱ(CA2)試劑盒 ,，英文名： CA2 ELISA Kit
Mouse glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 小鼠糖皮質激素受體α(GR-α)試劑盒
RatThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 大鼠促甲狀腺素(TSH)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHLA-E(HumanleukocyteaigenE)ELISAKit人類白細胞抗原E
細胞PKG-II激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCRP大鼠C反應蛋白
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
化工儀器網