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參考價(jià)	￥1-￥6200	/件

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào)	YS-01X7062	主要用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

兔骨骼肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體微管聚合促進(jìn)蛋白3抗體腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移抑制蛋白抗體兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞人氣管平滑肌細(xì)胞 OE-19人食管癌細(xì)胞 T24 [T-24] (人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

兔骨骼肌細(xì)胞

兔骨骼肌細(xì)胞

商品屬性：

組織來源	產(chǎn)品規(guī)格	細(xì)胞形態(tài)	貨號(hào)
骨骼肌組織	5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶	成纖維細(xì)胞樣	YS-01X7062

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔骨骼肌分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種,，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管,、淋巴分布,，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng),。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小、位置,、起止點(diǎn),、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌,、三角肌、梨狀肌等,。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,，不分支，有明顯橫紋,，核很多,，且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長(zhǎng)軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）,。明帶染色較淺，而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線,。H線的中部有一M線。明帶中間,，有一條較暗的線稱為Z線,。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段，叫做一個(gè)肌節(jié),。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,，細(xì)胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方，細(xì)胞多呈梭行,，具有一定的方向性,。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨骼肌采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨骼肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4,、胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

　　二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；

　　2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；

　　3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；

　　4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；

　　5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。

兔骨骼肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存：

細(xì)胞傳代步驟

細(xì)胞凍存步驟

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔骨骼肌細(xì)胞