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產(chǎn)品名稱：兔肝內(nèi)膽管上皮細胞

組織來源：膽管組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

兔肝內(nèi)膽管上皮分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用,；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機體中的腹部位置,，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方,。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收,，在保持,、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用，肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用,。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%,，其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復(fù)雜的生理代謝功能,，參與肝臟的代謝,、排泌、免疫等生理過程,，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用,。研究表明，常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎,、膽管癌等疾病,，都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位,，進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,，了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學(xué)特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制,、診斷和治療具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔肝內(nèi)膽管上皮 經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠腎素(Renin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin J chain (Ig-j) ELISA Kit j鏈(Ig-j)試劑盒

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

EscherichiacoliProtein,E.coliP試劑盒大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母氨含量光譜法定量試劑盒20次

MouseComplemefragme5a,C5aELISAKit小鼠補體片斷5a(C5a)試劑盒規(guī)格：96T/48T

kelch樣蛋白13抗體

脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (Fc 標簽) Protein

阿黑皮素原(POMC)重組蛋白 Recombinant Proopiomelanocortin (POMC)

AIF1重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

Kruppel樣因子4(KLF4)重組蛋白 Recombinant Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4)

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

GPT2 Protein Rat 重組大鼠 GPT2 蛋白

RNASE1重組人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 蛋白 Protein

兔肝內(nèi)膽管上皮細胞大鼠膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白(FPN)試劑盒 ，英文名： FPN ELISA Kit

Mouse ypsin (ypsin) ELISA Kit 小鼠(ypsin)試劑盒

RatdipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGHELISAKit大鼠生長激素

細胞甘油-3-0酸脫氫酶-1(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase-1)活性光譜法定量試劑盒20次

RatsolubleE-selectin,sE-selectinELISAKit大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

收到細胞如何處理,？

1,、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作