詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔肺泡巨噬細(xì)胞
組織來源:肺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液(12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔肺泡巨噬分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,,位于胸腔,,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,,左二右三,,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉,、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅,。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,,它們的末端膨大成囊,,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象,。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),,并可進(jìn)行純化,。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,,多用做原代培養(yǎng),,難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,,源自單核細(xì)胞,,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫),。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,,令其對(duì)病原體作出反應(yīng),。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,,有重要防御功能,。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲(chǔ)存器官,,為結(jié)核病的研究提供了重要的材料,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺泡巨噬采用機(jī)械研磨結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺泡巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠肌酸激酶(mouse CK) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠羥甲基賴酸(mouse CML) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠C-肽(mouse C-peptide) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)Elisa 試劑盒 96T/48T
Rat macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白2(MIP-2)試劑盒
Humanai-Reticulinaibody,ARAELISAKit 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanalcoholdehydrogenase,ADH試劑盒人乙醇脫氫酶(ADH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量試劑盒20次
Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
HER4抗體
肌肉骨骼受體酪激酶單克隆抗體
F2重組小鼠 Coagulation Factor II / FII / F2 蛋白 Protein
Annexin II 膜粘連蛋白-2抗原 0.5mgAnnexin II 膜粘連蛋白-2抗原
MSN重組人 MSN / Moesin 蛋白 (aa 1-346, His 標(biāo)簽) Protein
DDOST Protein Human 重組人 DDOST / OST48 蛋白
CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 蛋白
白介素9(IL9)重組蛋白 Recombinant Interleukin 9 (IL9)
DDOST Protein Human 重組人 DDOST / OST48 蛋白
PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 Protein
THY1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白
DUSP3重組人 DUSP3 / VHR 蛋白 Protein
兔肺泡巨噬細(xì)胞大鼠內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)試劑盒 ,,英文名: EG-VEGF ELISA Kit
Mouse oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒
Rattarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGHRP-Ghrelin(Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin)ELISAKit人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin
細(xì)胞輔酶Q含量比色法定量試劑盒20次
RatSolubleprotein-100,S-100ELISAKit大鼠S100蛋白(S-100)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作