詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺動脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7754 |
細(xì)胞簡介:
兔肺動脈平滑肌分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室,,在主動脈之前向左上后方斜行,,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,,經(jīng)肺門入肺,。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干,。起自右心室,,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,,分二支進(jìn)入左肺上,、下葉。右肺動脈較長而粗,,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上,、中,、下葉。肺動脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用,。肺動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。肺動脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓,,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進(jìn)肺動脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展,。肺動脈平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng),;②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。肺動脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓,;②先天性肺動脈狹窄,;③肺動脈栓塞。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動脈平滑肌采用 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔肺動脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
酸性酯酶染液 Eosinstain
中性酯酶染液 H-E dye
堿性酯酶染液 Wright'dye
雙重酯酶染液 Wright - Giemsa dye composite
豚鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)試劑盒
Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit 人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCreatineKinase,CK試劑盒人肌酸激酶(CK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子7抗體
肌切蛋白抗體
IL10RB重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 Protein
EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)
MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 Protein
IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白
IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)
IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白
IL10RB重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 Protein
IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 Protein
兔肺動脈平滑肌細(xì)胞大鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)試劑盒 ,,英文名: ITLN1 ELISA Kit
Monkey soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒
RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGHRP-Ghrelin(Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin)ELISAKit小鼠生長激素釋放肽ghrelin
細(xì)胞含量比色法定量試劑盒20次
RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。