詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7038 |
細胞簡介:
兔肺成纖維分離自肺組織,;肺是機體的呼吸器官,,位于胸腔,,左右各一,覆蓋于心之上,。肺有分葉,,左二右三,共五葉,。肺經肺系(指氣管,、支氣管等)與喉、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質細胞分化而來,;成纖維細胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持肺器官的正常形態(tài),,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織,。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔肺成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數板計數,。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
生長激素結合蛋白 (P) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
半乳糖凝集素 -3(Galectin-3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
腦神經相關生長蛋白 -43(GAP-43) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
生長分化因子 -15(GDF-15) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒 ,,英文名: AGEs ELISA Kit
Human concanavalin A (ConA) ELISA Kit 人刀A(ConA)試劑盒
MonkeyPlateletFactor4,PF-4ELISAKit血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBLI(HumanBeta-Lactamaseinhibitors)ELISAKit人β內酰胺酶抑制劑
細菌/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑20次
RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/RLAⅢELISAKit兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體
環(huán)指蛋白1抗體
CTSE重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein
ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復制因子2(多肽)
CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽)
ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復制因子2(多肽)
IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
CTSE重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein
FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽)
CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
兔肺成纖維細胞大鼠內皮素受體B(EB)試劑盒 ,,英文名: EB ELISA Kit
Monkey ai liver cell membrane aibody (LMA) ELISA Kit 猴抗肝細胞膜抗體(LMA)試劑盒
RatThyroxineaibody,TAbELISAKit 大鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGKRP(Humanglucokinaseregulatoryprotein)ELISAKit人葡萄糖激酶調節(jié)蛋白
細胞脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。