詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
顱骨組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7212 |
細胞簡介:
兔成骨分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),,起著保護和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,,內(nèi)有顱腔,容納腦,,共8塊,。面顱為顱的前下部分,包含眶,、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),構(gòu)成面部的支架,,共15塊,。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化,。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域,,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),,分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),形成骨吸收陷窩,;其后,,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質(zhì),,骨基質(zhì)礦化而形成新骨,;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制,、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學基礎,,也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔成骨采用先用短時間消化,、后用膠原酶反復消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔成骨經(jīng)ALP染色檢測,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次,;
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠巨噬細胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒 96T/48T
小鼠巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 96T/48T
小鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(AmAC-1)試劑盒 96T/48T
小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 96T/48T
小鼠卵巢癌標志物CA125ELISA 試劑盒 96T/48T
Human glucose oxidase (GOD) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶(GOD)試劑盒
HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit 人cAMP反應元件結(jié)合蛋白(CREB)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanactivatedproteinCresistance,APCR試劑盒人活化蛋白C抵抗素(APCR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
Grp94相鄰核苷酸酶抗體
環(huán)指蛋白113A抗體
COLEC12重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein
GPA33(glycoprotein A33 transmembrane 0.5mgGPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
CXCL10 Protein Human 重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白
OMG Protein Mouse 重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標簽)
GPA33(glycoprotein A33 transmembrane 0.5mgGPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原
CXCL10 Protein Human 重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白
COLEC12重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein
OMG Protein Mouse 重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標簽)
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
兔成骨細胞大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)試劑盒 ,英文名: ECE1 ELISA Kit
Mouse platelet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)試劑盒
Ratthyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGlp-1ELISAKit大鼠胰高血糖素樣肽1
細胞脯(proline)含量比色法定量試劑盒20次
Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(sAIL)試劑盒規(guī)格:96T/48T