大鼠直腸平滑肌細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠直腸平滑肌分離自直腸組織,；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內,。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結腸,，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈,，下端以而終,。直腸上端的大小似結腸，其下端擴大成直腸壺腹,，是糞便排出前的暫存部位,，最下端變細接,。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度,。直腸周圍多脂肪,、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側,。直腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈,。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式,；腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生,，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性,。利用腸平滑肌細胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮,、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應,。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二,、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗；

　　4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠直腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠直腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔子脫氫表雄酯(DHEA-S)試劑盒   96T/48T

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒   96T/48T

兔子瘦素(LEP)試劑盒   96T/48T

兔子結合蛋白4(RBP-4)試劑盒   96T/48T

小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat iact parathormone (i-PTH) ELISA Kit 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒

Humanproteiyrosinekinase,PTKELISAKit 人蛋白酪激酶(PTK/CD115)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBromodeoxyuridine,BrdU試劑盒人溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒20次

HumanSomatostatin，SSELISAKit人(SS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

卷曲螺旋結構域蛋白127抗體

腺嘌呤受體抗體

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospho-ATF2(pSer490/pSer498 0.5mgphospho-ATF2(pSer490/pSer498) 0酸化活化復制因子2抗原

ALCAM重組人 ALCAM / CD166 蛋白 Protein

GAL Protein Human 重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標簽)

CPB1 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白

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HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

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大鼠直腸平滑肌細胞大鼠整合素αM(ITGαM)試劑盒 ,，英文名： ITGαM ELISA Kit

Mouse Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒

MouseIerleukin12,IL-12/P70ELISAKIT 小鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit人糖化血紅蛋白A1c

無去垢劑裂解液用于物理裂解

ELISAKitTG大鼠甲狀腺球蛋白