大鼠羊膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞 人卵巢上皮細(xì)胞 脂肪酶家庭成員K抗體 小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 甲基化CpG結(jié)合蛋白3抗體 小鼠肝星狀細(xì)胞 KIAA1683蛋白抗體 pac2斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱：大鼠羊膜成纖維細(xì)胞

組織來源：羊膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、bFGF、Insulin,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2，5%

大鼠羊膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介：

大鼠羊膜成纖維分離自胎盤組織,；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。羊膜是胎盤的最內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,，含有眼表上皮細(xì)胞,，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑,，無血管,、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性,；在電鏡下,，其分為五層：上皮層、基底膜,、致密層,、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ,、Ⅲ,、Ⅳ、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份。羊膜成纖維細(xì)胞主要來自基底膜,、致密層,、纖維母細(xì)胞層。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠羊膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的大鼠羊膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒   96T/48T

豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)試劑盒   96T/48T

豚鼠端粒酶(TE)試劑盒   96T/48T

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒   96T/48T

小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glycoprotein 130 (gp130) ELISA Kit 人糖蛋白130(gp130)試劑盒

HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanB-CellLinkerProtein,BLNK試劑盒人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物種子高質(zhì)化葉綠體分離試劑盒10次

Huma-cellspecificGTPase,TgtpELISAKit人T細(xì)胞特異性鳥苷三0酸酶(Tgtp)試劑盒規(guī)格：96T/48T

DNA結(jié)合蛋白C抗體

氣味結(jié)合蛋白抗體

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

熱休克蛋白β2(HSPβ2)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2)

PKLR重組人 PKLR / PKRL 蛋白 Protein

FLRT3 Protein Human 重組人 FLRT3 蛋白

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N294S mutation) (高活性)

熱休克蛋白β2(HSPβ2)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2)

FLRT3 Protein Human 重組人 FLRT3 蛋白

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N294S mutation) (高活性)

PKLR重組人 PKLR / PKRL 蛋白 Protein

大鼠羊膜成纖維細(xì)胞大鼠白介素20(IL-20)試劑盒 ,，英文名： IL-20 ELISA Kit

Mouse cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA Kit 小鼠半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒

ELISA 小鼠白介素-2(mouse IL-2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-7(MouseIerleukin-7)ELISAkit小鼠白介素7

通用型肌酐(CREATININE)化學(xué)比色法定量試劑盒50次

ELISAKitAmylin大鼠胰淀素