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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7032 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠支氣管上皮分離自支氣管組織,；支氣管（Bronchi）,，是指由氣管分出的各級(jí)分枝,，由氣管分出的一級(jí)支氣管,，即左、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較,，前者較細(xì)長(zhǎng),，走向傾斜；后者較粗短,，走向較前者略直,，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,，而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,，不僅是各種病原體,、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成,、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子，從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng),。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘,、慢性阻塞性肺疾病、肺癌,、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用,。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此,，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子-1 英文名稱： Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1 規(guī)格： 英文縮寫： sICAM-1
小鼠干擾素-α 英文名稱： Ierferon α 規(guī)格： 英文縮寫： IFN-α
小鼠干擾素-β 英文名稱： Ierferon β 規(guī)格： 英文縮寫： IFN-β
小鼠干擾素-γ 英文名稱： Ierferon γ 規(guī)格： 英文縮寫： IFN-γ
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat methylase ELISA Kit (Methylase) 大鼠甲基化酶(Methylase)試劑盒
Humandynamin2,DNM2ELISAKit 人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2試劑盒人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離(活性)試劑盒10次
MouseAquaporin4,AQP-4ELISAKit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
金屬還原酶硬脂酸4抗體
線粒體核糖核酸酶P蛋白3抗體
NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原
AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白
CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白
NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein
大鼠支氣管上皮細(xì)胞大鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)試劑盒 ,，英文名： ADIPOR1 ELISA Kit
Mouse soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒
Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKIT 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體
B3高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitCollagenaseI大鼠膠原酶I
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