大鼠支氣管上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠支氣管上皮分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi）,，是指由氣管分出的各級分枝,，由氣管分出的一級支氣管，即左,、右主支氣管,。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長,，走向傾斜,；后者較粗短，走向較前者略直,，所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管,。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,，而支氣管不是,。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體,、炎癥介質作用的靶細胞,，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子,，從而參與氣道炎癥及免疫反應,。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病,、肺癌,、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態(tài)結構和功能活動上存在很大的相似性,，因此,，在基礎及臨床研究中極為重要。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；

　　2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；

　　7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液,；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液,。

　　二,、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；

　　2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；

　　3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗,；

　　4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；

　　5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮采用-混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮經PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。

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