詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
陰道組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7746 |
細胞簡介:
大鼠陰道壁成纖維分離自陰道組織,;陰道位于膀胱,、尿道和直腸之間,是一個富有彈性的管狀器官,。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經(jīng)血,、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,,也是一個重要的性交器官,。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層,即黏膜層,、肌層和外膜,。1)黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚,,為復(fù)層鱗狀上皮,,從基底層到表層由基底層、旁基底層,、中間層和表層組成,。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏,。2)肌層由平滑肌組織構(gòu)成,,肌束排列不規(guī)則,縱行和環(huán)形互相交錯,。肌束間有較多的結(jié)締組織和彈性纖維,。陰道外口有環(huán)形的橫紋肌稱括約肌。3)外膜層為纖維膜,,由結(jié)締組織構(gòu)成,,內(nèi)含豐富的彈性纖維、靜脈叢,、淋巴管和神經(jīng),。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層,成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠陰道壁成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠陰道壁成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ElisaKit ELISA. 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ElisaKit ELISA. 96T/48T
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor VIII related aigen (VIII -Ag) ELISA Kit 人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒
Humanenkephalin,ENKELISAKit 人腦啡肽(ENK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCS試劑盒人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒20次
MouseAquaporin1,AQP-1ELISAKit小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基丙二酰異構(gòu)酶抗體
細胞連接相關(guān)蛋白2抗體
CD84重組小鼠 CD84 蛋白 Protein
UL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)重組蛋白 Recombinant UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)
EPHA3重組人 EphA3 蛋白 Protein
CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
鈣結(jié)合蛋白(CR)重組蛋白 Recombinant Calretinin (CR)
CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
PTPRC重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (aa 453-1152, His & GST 標(biāo)簽) Protein
IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白
CRIPT重組人 CRIPT / cysteine-rich PDZ-binding 蛋白 Protein
大鼠陰道壁成纖維細胞大鼠中性粒細胞激活蛋白3(NAP3)試劑盒 ,,英文名: NAP3 ELISA Kit
Mouse soluble cell differeiation aigen 86 (B7-2/sCD86) ELISA Kit 小鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒
MouseFibronectin,FNELISAKit 小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanhypotheticalproteinLOC433328ELISAKit人假定蛋白LOC433328
B12高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitCTGF大鼠結(jié)締組織生長因子