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產(chǎn)品名稱：大鼠胰腺星狀細胞

組織來源：胰腺組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

細胞簡介：

大鼠胰腺星狀分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有,、原,、脂肪酶、等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞,、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖,；β細胞分泌胰島素,，降低血糖；γ細胞分泌,，以旁分泌的方式抑制α,、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應細胞,，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,，并表達Desmin蛋白,，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,，并分別具有特異的標志物,。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽性表達Desmin,。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA,。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細胞培養(yǎng)6d,，胞漿中仍可見明顯的脂滴,，傳代后,，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示,，細胞接種24h仍然表達Desmin,，48h后Desmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA,，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,，細胞表達alpha-SMA，而不再表達Desmin,，說明細胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活,，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時,，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,，導致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,，促使基質(zhì)增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胰腺星狀采用膠原酶制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胰腺星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性壞死因子-α受體   英文名稱：   soluble tumor necrosis factor receptor 1   規(guī)格：      英文縮寫：   Stnf-αR

小鼠組織多肽抗原   英文名稱：   Tissue Polypeptide Aigen   規(guī)格：      英文縮寫：   TPA

小鼠血小板生成素   英文名稱：   Thromboietin   規(guī)格：      英文縮寫：   TPO

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   AIL/APO 2L

小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human coagulation factor IX (F IX) ELISA Kit 人Ⅸ(FⅨ)試劑盒

Humanlowmolecular-weightprotein/proteasomebeta-typesubunit,LMP7/PSMB9ELISAKit 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHP試劑盒人17羥孕同(17-OHP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒20/200次

MouseAquaporin0,AQP-0ELISAKit小鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒規(guī)格：96T/48T

即刻早期應答蛋白5抗體

細胞角蛋白20重組兔單克隆抗體

PTPRC重組小鼠 CD45 / PTPRC 蛋白 (aa 453-1152, His & GST 標簽) Protein

鈣結(jié)合蛋白(CR)重組蛋白 Recombinant Calretinin (CR)

CRIPT重組人 CRIPT / cysteine-rich PDZ-binding 蛋白 Protein

CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽)

IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白

UL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)重組蛋白 Recombinant UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)

CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽)

CD84重組小鼠 CD84 蛋白 Protein

EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽)

EPHA3重組人 EphA3 蛋白 Protein

大鼠胰腺星狀細胞大鼠中性粒細胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)試劑盒 ,，英文名： NGAL ELISA Kit

Mouse soluble cell differeiation aigen 40 Ligand (sCD40L) ELISA Kit 小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒

MouseFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit 小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanHypotheticalproteinLOC677168ELISAKit人假定蛋白LOC677168

B12比色法定量試劑盒20次

ELISAKitHpt/HP大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白

收到細胞如何處理？

1,、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作