詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7091 |
細(xì)胞簡介:
大鼠胰腺上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有,、原,、脂肪酶、等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞,、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,,升高血糖,;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖,;γ細(xì)胞分泌,,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌,;PP細(xì)胞分泌胰多肽,,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮,。胰腺干細(xì)胞在發(fā)育上被認(rèn)為分離自內(nèi)胚層胰腺上皮,,在隨后的胰腺發(fā)育過程中,胰腺干細(xì)胞分化為胰島細(xì)胞(α,、β,、δ、PP細(xì)胞),、導(dǎo)管上皮細(xì)胞以及腺泡細(xì)胞,。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來源的細(xì)胞,包括成纖維細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞,、血管平滑肌細(xì)胞以及星形細(xì)胞,其中以成纖維細(xì)胞占主要部分,。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細(xì)胞就要排除間充質(zhì)來源的細(xì)胞,,尤其是成纖維細(xì)胞。目前常用的去除成纖維細(xì)胞方法有機(jī)械刮除法,、消化以及膠原酶消化法等,,胰腺上皮細(xì)胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)試劑盒 96T/48T
小鼠受體()ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor XIII (F XIII) ELISA Kit 人ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒
Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2試劑盒人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞樣品氧化酶活性測定試劑盒20次
Mouseapoprotein,apo-A1ELISAKit小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
基底膜相關(guān)軟骨素蛋白多糖抗體
細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體
CPA2重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein
內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 Protein
CSNK1G1 Protein Human 重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性)
內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
CSNK1G1 Protein Human 重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CPA2重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein
NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 Protein
大鼠胰腺上皮細(xì)胞大鼠腫瘤蛋白p53(TP53)試劑盒 ,,英文名: TP53 ELISA Kit
Mouse soluble cell differeiation aigen 30 (sCD30) ELISA Kit 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)試劑盒
MouseE-SelectinELISAkit 小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit樣轉(zhuǎn)錄體受體
微型RNA文庫數(shù)據(jù)庫(在建)會員制
ELISAKitADAM8大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。