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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠胰島β細胞
組織來源:胰腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞簡介:
大鼠胰島β分離自胰腺組織,;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,,腺泡分泌胰液,,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有,、原,、脂肪酶、等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,,胰島主要由4種細胞組成:α細胞,、β細胞、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素,,升高血糖;β細胞分泌胰島素,,降低血糖,;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α,、β細胞的分泌,;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮,。胰島β細胞,即胰島B細胞,,是胰島細胞的一種,,屬內(nèi)分泌細胞的一種,能分泌胰島素,,與胰島α細胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用,。胰島B細胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足(胰島素抵抗),,會使血糖升高,,從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細胞癌變會生成胰島素瘤,,引起惡性血糖降低癥狀,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用逐級消化胰島制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠胰島β經(jīng)Insulin含量檢測,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理,?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性細胞間粘附分子 -1 (mouse sICAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠干擾素 - a (mouse IFN- a ) 作用: ELISA 規(guī)格: 72T 美國 R&D
小鼠干擾素 - g (mouse IFN- g ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 法國 Diaclone
小鼠免疫球蛋白 E (mouse IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 ADI
小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor III (F III) ELISA Kit 人Ⅲ(FⅢ)試劑盒
HumanGliadinIgAELISAKit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human15-lipoxygenase,15-LO/LOX試劑盒人15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseAquaporin3,AQP-3ELISAKit小鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
肌動蛋白抑制因子1抗體
尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體
C5重組人 Complement C5a 蛋白 Protein
角蛋白4(KRT4)重組蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)
PLA2G2D重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CSH1 Protein Human 重組人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
角蛋白4(KRT4)重組蛋白 Recombinant Keratin 4 (KRT4)
CSH1 Protein Human 重組人 Placental Lactogen / CSH1 蛋白
C5重組人 Complement C5a 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
PLA2G2D重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠胰島β細胞大鼠腫瘤壞死因子配體超家族成員12(TNFSF12)試劑盒 ,英文名: TNFSF12 ELISA Kit
Mouse soluble Endoglin (ENG/sCD105) ELISA Kit 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒
Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanImmunoglobulinG,IgGELISAKitG
微型RNA(miRNA)文庫構(gòu)建技術(shù)服務(wù)1個樣本
ELISAKitMDC/CCL22大鼠巨噬細胞來源的趨化因子