詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7659 |
細胞簡介:
大鼠羊膜上皮分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成,。胎兒在子宮中發(fā)育,,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當的獨立性,。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,,這樣的結構稱假胎盤,。羊膜是胎盤的最內層,與眼結膜組織結構相似,,含有眼表上皮細胞,,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,,無血管、神經及淋巴,,具有一定的彈性,;在電鏡下,其分為五層:上皮層,、基底膜,、致密層、纖維母細胞層和海綿層,,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元,,主要為Ⅰ、Ⅲ,、Ⅳ,、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份,。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,,且還有合成,、釋放生物活性物質和神經營養(yǎng)因子的功能。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠羊膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品:
小鼠CXCR4(mouse CXCR-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠皮質(mouse Coicosterone) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠鉤端IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒
Human cyclophilin A (CyPA) ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒
HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 人可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒 進口分裝
Humanai-teichoicacidaibody,TA試劑盒人抗0壁酸抗體(TA)試劑盒
植物線粒體粗提分離試劑盒10次
Humani-iodothyronine,,T3ELISAKit人三甲狀腺原(T3)試劑盒
肌醇四磷酸激酶1抗體
微絲相關蛋白1抗體
EFNA5重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein
乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)重組蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)
IL17F重組人 IL-17F / IL17F 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽)
NS2 Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2
乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)重組蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽)
EFNA5重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein
NS2 Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2
IL17F重組人 IL-17F / IL17F 蛋白 Protein
大鼠羊膜上皮細胞大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)試劑盒 ,英文名: TNFRSF1A ELISA Kit
Mouse granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 小鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒
MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanImmunoglobulinM,IgMELISAKitM
微型RNA(miRNA)同位素探針制備試劑盒10次
ELISAKitAmAC-1大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,,應將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。