大鼠牙周膜干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：GSK3β相互作用蛋白抗體 FAAP24蛋白抗體 原鈣粘蛋白16抗體 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 SNB-19人腦膠質(zhì)瘤 HIT-T15 (倉鼠胰島β細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠牙周膜干細(xì)胞

組織來源：牙周膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、EGF、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞簡介：

大鼠牙周膜干分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶,、牙周間隙）是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成,。多數(shù)纖維排列成束,，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi)，另一端則埋于牙槽窩骨壁里,，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi),；牙周膜內(nèi)有神經(jīng),、血管,、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來源于胚胎時期的中胚層組織,，具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,，具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞,、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,，運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景，目前已能夠從骨髓,、脂肪,、滑膜、骨骼,、肌肉等組織以及羊水,、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞,。牙周膜干細(xì)胞參與了牙周組織的病變,、修復(fù)及再生過程。現(xiàn)在,，利用牙周膜干細(xì)胞建立體外模型,，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙周膜干采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細(xì)胞如何處理,？

1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒   96T/48T

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒   96T/48T

小鼠甲基化酶(Methylase)試劑盒   96T/48T

小鼠己糖激酶(HK)試劑盒   96T/48T

小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 人前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒

HumanleukocyteaigenG,HLA-GELISAKit 人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanadrenalcoexaibody,ACA試劑盒人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物a-(a-AMYLASE)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit小鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)指蛋白156抗體

吞噬細(xì)胞運(yùn)動蛋白2抗體

THY1重組食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein

IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原

DDOST重組人 DDOST / OST48 蛋白 Protein

DCBLD1 Protein Human 重組人 Discoidin / DCBLD1 蛋白

PDPN Protein Mouse 重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白

IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原

DCBLD1 Protein Human 重組人 Discoidin / DCBLD1 蛋白

THY1重組食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein

PDPN Protein Mouse 重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白

DDOST重組人 DDOST / OST48 蛋白 Protein

大鼠牙周膜干細(xì)胞大鼠重肽神經(jīng)絲蛋白(NEFH)試劑盒 ,，英文名： NEFH ELISA Kit

Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)試劑盒

MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰島素受體β

微型RNA(miRNA)擴(kuò)增試劑盒20次

ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β