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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
牙齦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7582 |
細胞簡介：
大鼠牙齦上皮分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,，呈粉紅色,、有光澤、質堅韌,。牙齦邊緣稱為齦緣,，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝,。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突,。也叫齒齦，通稱牙床,；是指包住齒頸的黏膜組織,，粉紅色，內有很多血管和神經(jīng),。牙齦上皮長期被認為是抵御口腔中持續(xù)存在的細菌的被動免疫屏障,，隨著對牙周致病菌的不斷認識,，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障，上皮細胞還可以分泌抗菌多肽,，參與先天性免疫,。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障，在抵御牙周炎細菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用,，建立正常牙齦上皮細胞體外培養(yǎng)體系,，將為各種牙齦上皮相關的研究提供穩(wěn)定的實驗模型。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品：
小鼠抗抗體(AOAb)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒 96T/48T
小鼠抗鹽抵抗的酸性0酸酶(AP)試劑盒 96T/48T
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒 96T/48T
小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat alkaline phosphatase (ALP) ELISA Kit 大鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒
HumanFreeProteinS,FP-SELISAKit 人游離蛋白S(FP-S)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRab試劑盒人乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
正常人體腸組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
紅細胞膜蛋白55抗體
透明質酸合成酶2單克隆抗體
TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein
CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白
SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 標簽)
CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白
TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 標簽)
PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein
大鼠牙齦上皮細胞大鼠周期素依賴性激酶2(CDK2)試劑盒 ,，英文名： CDK2 ELISA Kit
Mouse proliferating cell nuclear aigen aibody (PCNA) ELISA Kit 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒
MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanInvolucrin,iNVELISAKit人套膜蛋白
微型RNA(miRNA)表達載體細胞轉染試劑盒10次
ELISAKitMIP-1β/CCL4大鼠巨噬細胞癥蛋白1β
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