詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
嗅球組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7366 |
細胞簡介:
大鼠嗅鞘分離自嗅球組織;嗅鞘細胞(OECs)是在功能上介于施旺細胞和少突膠質(zhì)細胞之間的一種特殊的膠質(zhì)細胞,,具有神經(jīng)營養(yǎng),、抑制膠質(zhì)增生、瘢痕形成,、成鞘作用等;為軸突生長提供了適宜的微環(huán)境及較強的遷移的特性,,使其成為促進中樞神經(jīng)再生的理想候選細胞之一,。嗅鞘細胞是目前所發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)可以再生細胞之一,其特點為終身具有神經(jīng)再生功能,,還能夠釋放多種神經(jīng)營養(yǎng)因子,、神經(jīng)粘附分子。被認為是髓鞘化能力強的膠質(zhì)細胞,,逐漸用于治療脊髓損傷。嗅鞘細胞與膠質(zhì)細胞,、雪旺細胞在表現(xiàn)型上有共同點,,它們都能促進軸突的再生,主要區(qū)別在于嗅鞘細胞不但存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng),,也存在于外周神經(jīng)中,。嗅鞘細胞被認為是一種可塑性很高的細胞,它可表現(xiàn)出多種細胞形態(tài)和細胞表面標志,,在嗅系統(tǒng)發(fā)育過程中,,嗅鞘細胞根據(jù)其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,,其中P75NTR、GFAP,、和O4可標記大部分在體嗅鞘細胞,,然而在嗅球外神經(jīng)層O4陽性嗅鞘細胞仍然可以在P75NTR陽性細胞層內(nèi)分化成E-NCAM陽性的細胞層,還有一定比率的嗅鞘細胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽性,。嗅黏膜中的神經(jīng)元是生后才生長并在成年時繼續(xù)分化的神經(jīng)元,,壽命為4-12周,隨著新細胞的生長,,又建立了新的神經(jīng)支配關(guān)系,。嗅鞘細胞存在于嗅神經(jīng)及嗅球的神經(jīng)層上,沿嗅神經(jīng)的全長,,從周圍神經(jīng)系統(tǒng)到中樞神經(jīng)分布,。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠嗅鞘采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠嗅鞘經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔環(huán)0酸鳥苷(rabbit cGMP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
兔C反應(yīng)蛋白(rabbit CRP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
兔軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(rabbit COMP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
兔環(huán)氧化酶-1(rabbit COX-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠3(VD3)試劑盒
Humahyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4試劑盒人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase,PDXPELISAKit人哆/哆醇B60酸酶(PDXP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
固醇酰脫氫酶1抗體
絲蛋白酶抑制劑B7抗體
EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原
GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白
GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白
Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原
HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白
EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白
GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠嗅鞘細胞大鼠轉(zhuǎn)酶(ALT)試劑盒 ,,英文名: ALT ELISA Kit
Mouse alpha mannosidase (alpha Manase) ELISA Kit 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)試劑盒
ELISA 小鼠雌二醇(mouse E2) 進口分裝
CLIAKitfoR(Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor)ELISAKit人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體
通用型單核增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)試劑盒20次
ELISAKitTGF-β1大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。