本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！

產(chǎn)品名稱：大鼠心臟干細胞

組織來源：心臟組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 長梭形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

大鼠心臟干分離自心臟組織,；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,，主要功能是為血液流動提供壓力,，把血液運行至身體各個部分,。心臟由心肌構(gòu)成，左心房,、左心室,、右心房、右心室四個腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣）,，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,，向器官,、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無機鹽、尿素和尿酸等）,，使細胞維持正常的代謝和功能,。研究發(fā)現(xiàn)，心臟干細胞是一種多潛能細胞,，具有再生和克隆能力,，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內(nèi)皮細胞,。體內(nèi)研究顯示,，從心臟中分離出的心臟干細胞，經(jīng)體外簡單培養(yǎng),、增殖和標記后,，移植到心肌梗死邊緣區(qū)域，心梗血流動力學和心室壁厚度較對照組明顯改善,，心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標記的心肌細胞,、平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小,，但表達一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈,、α-肌動蛋白,、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等,，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復作用,。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟,，有定向心臟細胞系分化的趨勢,，體內(nèi)外可以分化成心肌細胞、血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞,，同時自體移植不存在免疫排斥反應及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點,。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細胞是這一治療應用于臨床的關(guān)鍵所在。因此,，研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領域研究的熱點問題之一,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠心臟干采用機械剪碎組織、膠原酶分次消化法結(jié)合差速貼壁,、心臟干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠心臟干經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒   96T/48T

小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒   96T/48T

小鼠固酮(ALD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒

Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 人堿性胎兒蛋白(BFP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLA試劑盒豚鼠主要組織相容性復合體(MHC/GPLA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞活性線粒體分離試劑盒10次

Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

干擾素調(diào)節(jié)因子9抗體

視網(wǎng)膜母細胞瘤結(jié)合蛋白5抗體

PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein

Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白

SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein

CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標簽)

NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)

Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白：納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白

CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標簽)

PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)

SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein

大鼠心臟干細胞大鼠阻抑素(PHB)試劑盒 ,，英文名： PHB ELISA Kit

Mouse tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 小鼠神經(jīng)生長導向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌標志物

土壤砷元素比色法定量試劑盒20次

ELISAKitA大鼠抗受體

收到細胞如何處理？

1,、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3,、仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%,，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作