詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠心肌細(xì)胞
組織來(lái)源:心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠心肌分離自心臟組織,;心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官,,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,,左心房,、左心室、右心房,、右心室四個(gè)腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi),故互不相通,,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),,這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流,。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),,向器官、組織提供充足的血流量,,以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),,并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽,、尿素和尿酸等),,使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形,、多邊形等不規(guī)則形狀,;細(xì)胞培養(yǎng)2h后開(kāi)始貼壁,呈梭形,;到12h左右,,細(xì)胞開(kāi)始伸出偽足,呈菱形,、多角形,;分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足,、呈巴掌狀,,部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng);心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,,在體外不增殖,。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng),,且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡(jiǎn)便,、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn),。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),,研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué),、凋亡、受體下調(diào),、缺血預(yù)處理,、信號(hào)通路、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,,對(duì)于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔(NO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔p物質(zhì)(SP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤(pán)蛋白(PP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體
生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體
SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原
SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白
IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體抗原
HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白
SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein
IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白
SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠心肌細(xì)胞大鼠組胺H3受體(HRH3)試劑盒 ,,英文名: HRH3 ELISA Kit
Mouse ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 小鼠抗抗體(AsAb)試劑盒
Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴細(xì)胞因子
土壤(lithium)化學(xué)比色法定量試劑盒50次
ELISAKitdsDNA大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體