詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7363 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠小腦顆粒分離自小腦皮層組織;神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)與功能單位,,小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元,,直徑約10μm,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富,,近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半,。由于小腦神經(jīng)元的生長(zhǎng)、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似,,而且數(shù)量多,、便于取材,因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育,、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機(jī)制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段,。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元,在哺乳動(dòng)物的小腦內(nèi)數(shù)量為豐富,。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系,,形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路,在小腦的神經(jīng)活動(dòng)中起著非常重要的作用,。在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病中,,病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元,導(dǎo)致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損,,從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調(diào),。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動(dòng)物傳染性海綿狀腦病病理學(xué)變化中的反應(yīng)、病理發(fā)生的機(jī)理特別是分子機(jī)理,,有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細(xì)胞模型的建立,。小腦顆粒細(xì)胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維,正是這種排列保證了興奮的單向傳導(dǎo),,這是小腦功能理論中的關(guān)鍵假設(shè),,小腦顆粒細(xì)胞通過(guò)g-氨基丁酸接受戈?duì)柤?xì)胞的抑制性突觸的信息傳入。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腦顆粒采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腦顆粒經(jīng)NSE免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠同型半胱酸(Hcy)試劑盒 96T/48T
小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)試劑盒 96T/48T
小鼠鐵蛋白(FE)試劑盒 96T/48T
小鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒 96T/48T
小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒 96T/48T
Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒
Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1試劑盒雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘露聚糖結(jié)合凝集素抗體
腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體
MDH1重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 Protein
HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原
CD160重組人 CD160 蛋白 Protein
CFHR2 Protein Human 重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白
CSRP1 Protein Mouse 重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白
HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原
CFHR2 Protein Human 重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白
MDH1重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 Protein
CSRP1 Protein Mouse 重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白
CD160重組人 CD160 蛋白 Protein
大鼠小腦顆粒細(xì)胞大鼠組蛋白H2B(H2B)試劑盒 ,,英文名: H2B ELISA Kit
Nude mouse alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒
MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3
土壤元素比色法定量試劑盒20次
ELISAKitAMA大鼠抗心肌抗體