詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
小腸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7151 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠小腸隱窩上皮分離自小腸組織,;小腸位于腹中,,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,,下接盲腸,,分為十二指腸、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,,基本上完成了消化過程,,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,,粘膜有許多絨毛,,絨毛根部的上皮下陷至固有層,,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞,、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣,。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主,。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn),,在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達(dá),向下逐漸減少和變矮,,至腸中段以下基本消失,。粘膜表面還有許多細(xì)小的腸絨毛,是由上皮和固有層向腸腔突起而成,,形狀不一,,以十二指腸和空腸頭段發(fā)達(dá)。絨毛于十二指腸呈葉狀,,于空腸呈指狀,,于回腸則細(xì)而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴(kuò)大20-30倍,,絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,,又稱腸隱窩,故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的,,小腸腺直接開口于腸腔,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腸隱窩上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腸隱窩上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔血栓素B2(TXB2)試劑盒 96T/48T
兔血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒 96T/48T
兔血清(NO)試劑盒 96T/48T
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 96T/48T
小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 人孕酮受體(PGR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanChorionicGonadoophin,HCG試劑盒人絨毛膜(HCG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20次
HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISAKit人傷寒抗原(St-Ag)試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈣連蛋白重組兔單克隆抗體
神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體
結(jié)晶紫染色液 100ml
TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)
CD226重組人 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
GYPC Protein Human 重組人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白
NBL1 Protein Human 重組人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白
TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)
GYPC Protein Human 重組人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白
結(jié)晶紫染色液 100ml
NBL1 Protein Human 重組人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白
CD226重組人 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞大鼠組蛋白脫乙?;?span>1(HDAC1)試劑盒 ,,英文名: HDAC1 ELISA Kit
Mouse ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒
MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit人巨噬細(xì)胞刺激蛋白
土壤α活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACA-IgG大鼠抗心0脂抗體IgG
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。