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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7182 |
細(xì)胞簡介：
大鼠小腸黏膜上皮分離自小腸組織；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),，上連胃幽門,，下接盲腸，分為十二指腸,、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后,，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成,。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層,，形成管狀的腸腺,，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞,、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞,。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣,。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,，其中以吸收和分泌功能為主,。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動的動力，促使食物向下運動,。腸黏膜上皮細(xì)胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線,。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收,、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強度。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠小腸黏膜上皮采用先機械分離法,、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行,。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 96T/48T
小鼠戊糖素(Peosidine)試劑盒 96T/48T
小鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素（OXM）試劑盒 96T/48T
小鼠胃泌素（GT）試劑盒 96T/48T
小鼠(VD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒
HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenLaminin,LN試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
富含亮重復(fù)蛋白15抗體
神經(jīng)叢蛋白A4抗體
GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype A, strain 92UG037.1) (Fc 標(biāo)簽) Protein
TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3 0.5mgTGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長因子–β3(抗原)
NAALADL1重組人 NAALADL1 蛋白 Protein
CDNF Protein Human 重組人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3 0.5mgTGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長因子–β3(抗原)
CDNF Protein Human 重組人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype A, strain 92UG037.1) (Fc 標(biāo)簽) Protein
LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
NAALADL1重組人 NAALADL1 蛋白 Protein
大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠組織蛋白酶K(CTSK)試劑盒 ,，英文名： CTSK ELISA Kit
Pean agglinin (PNA) ELISA Kit 花生凝集素(PNA)試劑盒
MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhumanmajorvaultprotein,MVPELISAKit人主要穹窿蛋白
土壤DNA分離+高質(zhì)化試劑盒20/50次
ELISAKitPCNA大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體
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