詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
下頜骨組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7647 |
細(xì)胞簡介:
小鼠下頜骨成纖維分離自下頜骨組織,;下頜骨位于面下部,呈弓形,,圍成口腔的前壁和側(cè)壁,,是面部能活動的骨骼;其水平部分為下頜體,,其垂直部分為下頜支,,表層為骨密質(zhì),內(nèi)部為骨松質(zhì),,與顳骨關(guān)節(jié)凹組成顳下頜關(guān)節(jié),。下頜體分內(nèi)、外兩面及上,、下兩緣,。下頜支分兩面、四緣及兩突,。下頜支與顳骨形成關(guān)節(jié),。該關(guān)節(jié)非常靈活,可做出包括咀嚼動作在內(nèi)的多種動作下頜骨的骨小梁也順應(yīng)咀嚼肌的拉力和力傳送的方向而排列,,斜向上后排列成線形,;下頜骨的骨質(zhì)較致密,血供較差,,除主要接受下齒槽動脈血供外,,又接受來自骨表面黏骨膜動脈分支的血液供應(yīng)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠下頜骨成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠下頜骨成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人孕受體試劑盒 人孕受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人孕受體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人孕受體試劑盒,、人孕受體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒 人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒、人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人孕激素試劑盒 人孕激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人孕激素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人孕激素試劑盒,、人孕激素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人1試劑盒 人1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人1試劑盒,、人1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytochrome P450c21B/21- hydroxylase (CYP21B) ELISA Kit 人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒
Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISAKit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclosporineA,CsA試劑盒人A(CsA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性試劑盒20次
Humanpokeweedmitogen,PWMELISAKit人美洲商陸素(PWM)試劑盒規(guī)格:96T/48T
防御素β-125/β-defensin 125抗體
乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1
SELE重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)
ACOT13重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 Protein
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SELE重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
ACOT13重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 Protein
大鼠下頜骨成纖維細(xì)胞人乙型肝病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA 試劑盒
Human tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒
HumanIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanIerleukin5,IL-5試劑盒人白介素-5(IL-5)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織亮(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
HumanIerleukin2,,IL-2ELISAKit人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒規(guī)格:96T/48T