詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠胃平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源:胃組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠胃平滑肌分離自胃組織,;胃柔軟,活體呈橘紅色,。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,,充盈時(shí)變平坦。胃壁由粘膜,、粘膜下膜,、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮,。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體(胃底腺,、賁門(mén)腺、幽門(mén)腺),它們的分泌物混合形成胃液,,對(duì)食物進(jìn)行化學(xué)性消化,。粘膜在幽門(mén)處由于覆蓋幽門(mén)括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門(mén)瓣。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成,,外層縱形,,中層環(huán)形,內(nèi)層斜行,,其中環(huán)形肌發(fā)達(dá),,在幽門(mén)處特別增厚形成幽門(mén)括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層,,細(xì)胞通過(guò)緊密連接,,進(jìn)行同步性運(yùn)動(dòng),完成肌肉的舒縮活動(dòng),,以推動(dòng)食物前進(jìn),,完成對(duì)食物的機(jī)械性消化,并促進(jìn)化學(xué)性消化和吸收,。胃平滑肌具有肌組織的共同特性,,如興奮、自律性,、傳導(dǎo)性和收縮性,,在離體后,置于適宜的環(huán)境內(nèi),,仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運(yùn)動(dòng),,但其收縮很緩慢,節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則,。胃平滑肌對(duì)電刺激較不敏感,,但對(duì)于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感,,輕微的刺激??梢饛?qiáng)烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開(kāi)的,,胃內(nèi)容物對(duì)平滑肌的牽張,、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進(jìn)或排空的自然刺激因素。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人孕激素/孕(PROG)試劑盒 96T/48T
人原鈣黏素1(PCDH1)試劑盒 96T/48T
人(Protamine)試劑盒 96T/48T
人誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒 96T/48T
豚鼠白介素10(IL-10)試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
Human non neuronal enolase (NNE) ELISA Kit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)試劑盒
rabbitiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/MELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M
細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板50個(gè)
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
范可尼貧血相關(guān)蛋白E抗體
溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族30成員5抗體
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His 標(biāo)簽) Protein
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)重組蛋白 Recombinant Glucose Transporter 1 (GLUT1)
CGB5重組人 CGB5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白
HA Protein H12N1 重組甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)重組蛋白 Recombinant Glucose Transporter 1 (GLUT1)
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H12N1 重組甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
CGB5重組人 CGB5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠胃平滑肌細(xì)胞人乙型肝病毒X抗原(HBxAg)ELISA 試劑盒
Human tissue polypeptide specific aigen (TPS) ELISA Kit 人組織多肽特異性抗原(TPS)試劑盒
HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISAKit 人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanIerleukin4,IL-4試劑盒人白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
HumanIerleukin23,,IL-23ELISAKit人白介素23(IL-23)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作