大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：異質(zhì)核核糖核蛋白U樣蛋白1抗體 轉(zhuǎn)錄因子ETV6抗體 黑素細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞 小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記;HepG2-LUC RIN-m5F (大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：胃組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠胃黏膜上皮分離自胃黏膜組織,；胃黏膜柔軟,，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,，充盈時(shí)變平坦,。幽門(mén)處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門(mén)瓣,。胃黏膜可分為三層,，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成,、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌,、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層,，細(xì)胞為單層柱狀上皮,，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面,，防止胃酸和對(duì)胃黏膜的損害,。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、藥物,、激素對(duì)細(xì)胞的損傷,、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而的模型。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

人孕激素/孕(PROG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人超敏游離雌三醇(uE3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人去甲上腺素(NA)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

人前列腺素F(PGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠白介素10(IL10)試劑盒 ，英文名： IL10 ELISA Kit

Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)試劑盒

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforATGA/TGABELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體

線粒體復(fù)合物IV蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體

溶質(zhì)載體家族蛋白1成員A4抗體

FCGRT & B2M重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原

CLIC4重組人 CLIC4 蛋白 Protein

JAM3 Protein Human 重組人 JAM3 / JAM-C 蛋白

SEMA5A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原

JAM3 Protein Human 重組人 JAM3 / JAM-C 蛋白

FCGRT & B2M重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

SEMA5A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白

CLIC4重組人 CLIC4 蛋白 Protein

大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞人乙型肝病毒核心抗原(HBcAg) 試劑盒

Human tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 人組織多肽抗原(TPA)試劑盒

HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIerleukin3,IL-3試劑盒人白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織(lithium)酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

humanIerleukin27,，IL-27ELISAKit人白介素27(IL-27)試劑盒規(guī)格：96T/48T