詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
微血管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7567 |
細(xì)胞簡介:
大鼠微血管周分離自微血管組織;周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,,通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外,,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量,、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,,所以對血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物,、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料,。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個基膜,,基膜上有多種細(xì)胞連接,,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素,、纖連蛋白以及接合素,。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控,;毛細(xì)血管受損時,周細(xì)胞還可增殖,,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠血管周采用膠原酶-聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠微血管周經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人載脂蛋白E試劑盒 人載脂蛋白E試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白E試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人載脂蛋白E試劑盒、人載脂蛋白E 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人載脂蛋白C3試劑盒 人載脂蛋白C3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白C3試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人載脂蛋白C3試劑盒,、人載脂蛋白C3 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人載脂蛋白B100試劑盒 人載脂蛋白B100試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白B100試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人載脂蛋白B100試劑盒,、人載脂蛋白B100 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
人載脂蛋白A5試劑盒 人載脂蛋白A5試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白A5試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人載脂蛋白A5試劑盒、人載脂蛋白A5 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豚鼠白介素18(IL-18)試劑盒 ,,英文名: IL-18 ELISA Kit
Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒
rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-CGELISAKit大鼠絨毛膜β
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規(guī)格:96T/48T
泛肌動蛋白重組兔單抗
溶質(zhì)載體家族22成員10抗體
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠微血管周細(xì)胞人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA 試劑盒
Human ansfer factor (TF) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒
Humahymidylatesyhetase,TSELISAKit 人胸苷酸合成酶(TS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanIerleukin17,IL-17試劑盒人白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humaniestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。