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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠外周血中性粒細(xì)胞
組織來源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖,;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠外周血中性粒分離自外周血,;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。白細(xì)胞是一類無色,、球形、有核的血細(xì)胞,。白細(xì)胞不是一個均一的細(xì)胞群,,根據(jù)其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類:粒細(xì)胞,、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,,其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,,分為中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種,。中性粒細(xì)胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,,胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細(xì)小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒,。細(xì)胞核呈桿狀或2~5分葉狀,,葉與葉間有細(xì)絲相連。中性粒細(xì)胞具趨化作用,、吞噬作用和殺菌作用,。中性粒細(xì)胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,,胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒。這些顆粒多是溶酶體,,內(nèi)含髓過氧化酶、,、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,,與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān),。中性粒細(xì)胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,,它處于機(jī)體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細(xì)菌入侵的線,,具有很強(qiáng)的吞噬活性,,可吞噬細(xì)菌,、衰老的紅細(xì)胞、抗原一抗體復(fù)合物和壞死的細(xì)胞等,。中性粒細(xì)胞內(nèi)含有大量溶酶體酶,,因此能將吞噬入細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌和組織碎片分解,。當(dāng)中性粒細(xì)胞吞噬數(shù)十個細(xì)菌后,,自身發(fā)生解體,,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細(xì)胞是人體內(nèi)壽命短的細(xì)胞,一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定,48h活性下降,,96h基本死亡。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒經(jīng)瑞氏染色法,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
人載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人糖0脂酰肌醇(GPI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人美洲商陸素(PWM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠白介素1α(IL1α)試劑盒 ,,英文名: IL1α ELISA Kit
Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)試劑盒
rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforATMA/TMAB(HumanAi-ThyroidMicrosomeAibody)ELISAKIT人抗甲狀腺微粒體抗體
線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)ELISA定量試劑盒25次
Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體
溶酶體絲蛋白酶DPP2抗體
HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein
beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,,小鼠)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠外周血中性粒細(xì)胞人抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒
Human ansferrin receptor (TFR/CD71) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒
Humahymidinephosphorylase,TPELISAKit 人核苷0酸化酶(TP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanIerleukin16,IL-16試劑盒人白介素16(IL-16)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
HumanIestinalefoilfactor,ITFELISAKit人腸三葉因子(ITF)試劑盒規(guī)格:96T/48T