詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠輸尿管上皮細(xì)胞
組織來源:尿道組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠輸尿管上皮分離自輸尿管組織,;輸尿管上接腎盂,,下連膀胱,是一對細(xì)長的管道,,呈扁圓柱狀,,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),,沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進(jìn)入骨盆。輸尿管有三個狹窄部:一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處),;一個在越過小骨盆入口處,;后一個在進(jìn)入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石,、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),即瓦耳代爾鞘,,它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上,、中、下三段,,也可稱為腹段、盆段,、膀胱段,。其中,,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動脈處,;盆段,自髂動脈到膀胱壁,;膀胱段,,自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口,。輸尿管管壁分為4層,黏膜層,、固有層,、肌層、外膜,。黏膜層表面為移行上皮,,約有4-5層細(xì)胞;固有層由細(xì)密的結(jié)締組織構(gòu)成,,內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維,;輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成;外膜為疏松結(jié)締組織,,營養(yǎng)血管由外膜進(jìn)入輸尿管,。其中,輸尿管上皮細(xì)胞主要分布于黏膜層,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠輸尿管上皮采用先消化,、然后機(jī)械分離法使輸尿管分層,、后膠原酶消化,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒 96T/48T
山羊雌三醇(E3)試劑盒 96T/48T
山羊雌二醇(E2)試劑盒 96T/48T
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等電壓依賴性陰離子通道(內(nèi)參)重組兔單克隆抗體
驅(qū)動蛋白家族Member14蛋白抗體
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肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)
CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白
IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
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IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白
ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein
IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠輸尿管上皮細(xì)胞人游離蛋白S(FP-S)ELISA 試劑盒
Major histocompatibility complex class II (MHC II /HLA- II) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒
Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISAKit 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanIerferonα,IFN-α試劑盒人α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次
HumanKallikrein11,KLK11ELISAKit人11(KLK11)試劑盒規(guī)格:96T/48T