詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7378 |
細(xì)胞簡介:
大鼠視網(wǎng)膜Muller分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,,是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞,、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視錐、視桿細(xì)胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,,有感光作用,;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成,。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,,專司感光,,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多,。層叫雙節(jié)細(xì)胞,,約有10到數(shù)百個視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),,它貼于眼球的后壁部,,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,,在黃斑區(qū),其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞,,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%,,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關(guān)注。在超微結(jié)構(gòu)水平上,,Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度,,更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形,。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,,Muller細(xì)胞形態(tài)也會有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用,,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動,還能參與多種病理過程,,尤其是眼底增殖性病變,,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,,體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復(fù)消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
A(IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒 ,,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit
Human nonmethylated oligonucleotide (NON) ELISA Kit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒
RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生長因子(EGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M
細(xì)菌印度墨負(fù)性染色試劑盒50次
RabbitE-SelectinELISAKit兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規(guī)格:96T/48T
酯酶抑制劑8抗體
配對盒基因8抗體
PVRL1重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源)
F7重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein
IZUMO4 Protein Human 重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ACE2 Protein Mouse 重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Gastrin(human 0.5mgGastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源)
IZUMO4 Protein Human 重組人 IZUMO4 / C19orf36 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PVRL1重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ACE2 Protein Mouse 重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
F7重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein
大鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA 試劑盒
Human TNF related activation induced cytokine (ANCE) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(ANCE)試劑盒
Humanierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInhibin,INH試劑盒人抑制素(INH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性熒光定量試劑盒20次
HumanLeptieceptor,LEPRELISAKit人瘦素受體(LEPR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。